Ac mAb anti-PI3 Kinase p85 alpha de lapin pour WB, IF, IHC, ELISA - P27986

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PI3 Kinase p85 alpha

• Le gène PIK3R1 code la sous-unité régulatrice p85-alpha de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K), qui forme un hétérodimère avec une sous-unité catalytique p110 ; l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes (par exemple, l'isoforme 2 exprimée dans le muscle squelettique et le cerveau).
• p85-alpha agit comme un adaptateur qui se lie, via ses domaines SH2, aux résidus de tyrosine phosphorylés sur les récepteurs tyrosine kinase activés (par exemple, FGFR, KIT, PDGFR) et les protéines adaptatrices, recrutant la sous-unité catalytique p110 à la membrane plasmique pour une production localisée de PIP3. Références connexes : PMID:7518429
• Dans les tissus sensibles à l'insuline, p85-alpha est nécessaire pour l'absorption de glucose stimulée par l'insuline et la synthèse du glycogène, jouant un rôle critique dans la régulation métabolique.
• La protéine médie la signalisation en aval de multiples récepteurs de facteurs de croissance, y compris FGFR1–4, KIT, PDGFRA/B et l'intégrine ITGB2, influençant la croissance cellulaire, la survie et la migration. Références connexes : PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, avec une translocation dépendante du stimulus vers la membrane plasmique.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles étendues — phosphorylation, acétylation et ubiquitination — qui ajustent finement son activité et sa stabilité.
• Pendant le stress du réticulum endoplasmique (RE), p85-alpha favorise la translocation nucléaire de l'isoforme 2 de XBP1 d'une manière dépendante de l'insuline ou du stress du RE, contribuant à une amélioration de la tolérance au glucose en cas de surcharge métabolique. Références connexes : PMID:20348923
• L'isoforme 2 est enrichie dans le muscle squelettique et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le rein et le muscle cardiaque ; l'isoforme 2 et l'isoforme 4 sont toutes deux détectées au niveau protéique dans le muscle squelettique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 240–380, une région contenant le domaine inter-SH2 (iSH2) qui médie la liaison aux sous-unités catalytiques p110 ; l'anticorps peut reconnaître des épitopes conservés à travers les isoformes p85.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de p85-alpha est d'environ 84 kDa ; validez avec des témoins positifs tels que des lysats HepG2 ou 3T3-L1 stimulés à l'insuline, et incluez des échantillons humains, de souris ou de rat selon le cas.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération de l'antigène doivent être optimisées ; l'anticorps convient à la fois aux tissus congelés (IF-P) et inclus en paraffine.
• Dans l'immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage cytoplasmique avec un enrichissement membranaire potentiel lors de la stimulation par un facteur de croissance.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier d'une paire d'anticorps appariés ; la réactivité croisée entre l'humain, la souris et le rat élargit l'utilité dans les modèles translationnels.

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