Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-β-Caténine-S45 pour WB, ELISA - P35222

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la β-caténine

• La β-caténine (caténine bêta-1) est un effecteur aval clé de la voie de signalisation Wnt canonique. En l'absence de Wnt, elle forme un complexe de dégradation avec AXIN1/2, APC, CSNK1A1 et GSK3B qui phosphoryle ses résidus Ser/Thr N-terminaux, conduisant à l'ubiquitination par BTRC et à la dégradation par le protéasome. En présence de ligands Wnt, la β-caténine échappe à la dégradation, s'accumule dans le noyau et agit comme coactivateur des facteurs de transcription TCF/LEF pour activer les gènes cibles de Wnt.
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• Au-delà de la signalisation Wnt, la β-caténine fonctionne également comme coactivateur transcriptionnel pour d'autres facteurs, tels que NR5A2, et favorise la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) en activant les gènes cibles CTNNB1/TCF.
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• En tant que composant du complexe d'adhésion E-cadhérine:caténine, la β-caténine médie l'adhésion cellulaire au niveau des jonctions adhérentes, reliant les cadhérines au cytosquelette d'actine.
• La β-caténine est localisée dans de multiples compartiments subcellulaires, notamment le cytoplasme, le noyau, les jonctions adhérentes, la membrane cellulaire, le centrosome, le pôle du fuseau mitotique et la synapse, ce qui reflète ses rôles divers dans la signalisation, l'adhésion et la polarité.
• Les modifications post-traductionnelles régulent sa stabilité et son activité : elle est phosphorylée au niveau des résidus Ser/Thr N-terminaux pour la dégradation, acétylée, S-nitrosylée et ubiquitinylée ; elle est également soumise à une régulation médiée par la sumoylation. Les mots-clés d'UniProt incluent phosphoprotéine, glycoprotéine et conjugaison Ubl.
• L'analyse de l'expression tissulaire montre la présence de β-caténine dans les types cellulaires du follicule pileux (matrice basale et périphérique, gaine externe/ interne de la racine), le côlon, les neurones corticaux et les tissus de cancer du sein.
  Références associées : PMID:29367600
• Le gène CTNNB1 est associé à diverses pathologies, notamment les cancers (par réarrangements ou mutations stabilisatrices), le handicap intellectuel et d'autres troubles du développement.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été généré contre un phosphopeptide synthétique autour de la Ser45 de la β-caténine humaine ; il est attendu qu'il reconnaisse spécifiquement la β-caténine phosphorylée au niveau de la Ser45, mais pas la protéine non modifiée. Pour la détection endogène, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons.
• D'après les données du fournisseur, l'anticorps est adapté aux applications Western blot (WB) et ELISA. Pour le WB, validez la bande attendue d'environ 85 kDa dans des lysats de contrôle positif (par exemple, cellules stimulées par Wnt ou inhibées pour GSK3).
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la β-caténine de souris et de rat, ce qui le rend utile pour les organismes modèles courants. Confirmez toujours la spécificité dans votre système en utilisant des échantillons traités à la phosphatase ou des peptides de blocage spécifiques.
• Étant donné que l'état de phosphorylation de la β-caténine change rapidement avec le traitement cellulaire, un minutage expérimental précis et une manipulation rigoureuse des cellules sont essentiels ; envisagez d'utiliser un protocole de stabilisation de la β-caténine si vous devez également comparer les niveaux totaux.
• Ce produit est expédié sur glace pour préserver son activité ; stockez les aliquotes aux températures recommandées et évitez les cycles de gel-dégel.
• Pour l'ELISA, optimisez les concentrations de revêtement et les conditions de détection en utilisant des témoins standard de phosphopéptide versus non phosphopéptide pour garantir la spécificité du site phosphorylé.

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