Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-Ubiquitine-Ser65 pour WB, ELISA - P62979 / P62987 / P0CG47 / P0CG48

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Ubiquitine

• L'ubiquitine est une protéine hautement conservée de 76 acides aminés exprimée à partir de quatre gènes (RPS27A, UBA52, UBB, UBC), produisant des protéines de fusion (par exemple, ubiquitine-protéine ribosomique eS31 et eL40) et des précurseurs de polyubiquitine.
• Elle agit comme un modificateur post-traductionnel par conjugaison covalente aux résidus lysine des protéines cibles, formant des chaînes monomériques ou de polyubiquitine. Différents types de liaisons (Lys-6, -11, -29, -33, -48, -63 et linéaires) dictent divers résultats cellulaires, y compris la dégradation par le protéasome (Lys-48), la réparation de l'ADN (Lys-6/63), l'endocytose et la signalisation NF-κB (Lys-63).
• En tant que fusion avec la protéine ribosomique eS31, l'ubiquitine fait partie intégrante de la sous-unité ribosomique 40S et est essentielle pour l'assemblage du petit sous-unité processome et la biogenèse des ribosomes. Références associées : PMID:23636399 PMID:9582194 PMID:34516797
• L'ubiquitine se localise principalement dans le cytoplasme et le noyau, y compris le nucléole, ce qui correspond à ses rôles dans la dégradation des protéines, la signalisation et la biogenèse des ribosomes.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation sur Ser65, l'acétylation et l'ADP-ribosylation, régulent la structure et la fonction de l'ubiquitine. La phosphorylation sur Ser65 module spécifiquement l'assemblage des chaînes d'ubiquitine et est impliquée dans la mitophagie et la signalisation immunitaire innée.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation sur Ser65.
• Validez la spécificité phospho en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ; le signal devrait disparaître après déphosphorylation.
• Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, cellules stimulées vs. non stimulées) pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Pour l'ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• Notez que l'anticorps peut reconnaître l'ubiquitine provenant des quatre gènes en raison de la séquence conservée autour de Ser65 ; envisagez d'utiliser des knockdowns spécifiques de gènes si nécessaire.

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