Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-TIFA-T9 pour WB, ELISA - Q96CG3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine A contenant un domaine FHA interagissant avec TRAF

• La protéine A contenant un domaine FHA interagissant avec TRAF (TIFA), également connue sous le nom de T2BP, T6BP ou TIFAA, est codée par le gène TIFA (Gene ID : 92610) et appartient à une famille de protéines impliquées dans la signalisation de l'immunité innée.
• Molécule adaptatrice qui joue un rôle clé dans l'activation de la signalisation pro-inflammatoire NF-kappa-B suite à la détection de métabolites de motifs moléculaires associés aux pathogènes bactériens (PAMPs). Références associées : PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Favorise l'activation d'une réponse immunitaire innée en induisant l'oligomérisation et la polyubiquitination de TRAF6, ce qui conduit à l'activation de TAK1 et IKK par un mécanisme indépendant du protéasome. Références associées : PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• La réponse immunitaire innée dépendante de TIFA est déclenchée par l'ADP-D-glycéro-bêta-D-manno-heptose (ADP-Heptose), un PAMP puissant présent dans toutes les bactéries à Gram négatif et certaines bactéries à Gram positif : l'ADP-Heptose est reconnu par ALPK1, qui phosphoryle TIFA sur la thréonine 9, conduisant à l'homooligomérisation de TIFA et à l'activation subséquente de la signalisation pro-inflammatoire NF-kappa-B. Références associées : PMID:30111836
• Se localise principalement dans le cytoplasme, où elle peut interagir avec des kinases en amont et des effecteurs en aval tels que TRAF6.
• La phosphorylation post-traductionnelle sur la thréonine 9 est un événement régulateur critique, transformant TIFA en une plateforme de signalisation active ; des sites de phosphorylation supplémentaires peuvent exister, comme indiqué par sa classification en tant que phosphoprotéine.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 21,4 kDa (calculé à partir de la séquence) et fait partie d'un réseau reliant la détection des pathogènes aux réponses inflammatoires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la thréonine 9 de la TIFA humaine, ce qui suggère que l'anticorps est conçu pour reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée sur Thr-9 de TIFA. Confirmer la spécificité en utilisant des contrôles déphosphorylés ou des inhibiteurs pertinents.
• Pour le Western blot, la taille de bande prédite est d'environ 21 kDa ; envisagez d'optimiser les conditions de blocage et de détection pour minimiser la liaison non spécifique.
• En ELISA, assurez-vous que le peptide ou l'antigène protéique est correctement fixé et que l'état de phosphorylation est préservé pendant la préparation des échantillons.
• Étant donné que la réactivité croisée n'est indiquée que pour l'humain, validez l'anticorps dans les lignées cellulaires humaines ou les échantillons de tissus appropriés où la phosphorylation de TIFA est induite (par exemple, lors de l'activation d'ALPK1 par l'ADP-Heptose).
• Cet anticorps est adapté à des applications telles que le WB et l'ELISA ; pour d'autres formats de dosage, des expériences pilotes sont recommandées pour vérifier les performances.

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