Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-TBC1D4-T642 pour WB, ELISA - O60343

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TBC1D4 (AS160)

• TBC1D4, également connu sous le nom d'AS160 (substrat de l'Akt de 160 kDa), est un membre de la famille des domaines TBC1 et agit comme une protéine activatrice de la GTPase (GAP) pour les protéines RAB RAB2A, RAB8A, RAB10 et RAB14.
• L'isoforme 2 de TBC1D4 favorise la translocation induite par l'insuline du transporteur de glucose SLC2A4/GLUT4 vers la membrane plasmique, augmentant ainsi la capture de glucose dans les tissus sensibles comme le muscle squelettique et le tissu adipeux.
• Le gène code pour de multiples isoformes ; l'isoforme 1 est fortement exprimée dans le muscle squelettique et le cœur, tandis que l'isoforme 2 est largement exprimée avec une forte présence dans la glande surrénale, la thyroïde, le poumon, le rein, le côlon, le cerveau et le tissu adipeux.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, ce qui correspond à son rôle dans le trafic vésiculaire et la transduction du signal à partir du récepteur de l'insuline.
• TBC1D4 est régulée par phosphorylation à de multiples sites, dont la Thr642, qui est médiée par l'Akt/protéine kinase B en aval de la signalisation de l'insuline, et est cruciale pour son activité GAP et la translocation de GLUT4.
• Son expression est diminuée dans les îlots pancréatiques de patients atteints de diabète de type 2, reliant un dysfonctionnement de TBC1D4 à une homéostasie du glucose altérée ; elle est également régulée à la hausse dans les lymphocytes T de patients atteints de dermatite atopique, suggérant des rôles plus larges dans la modulation immunitaire.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation (résidus clés comme la Thr642), l'acétylation et la méthylation, qui affinent son activité et ses interactions.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la Thr642, garantissant la spécificité pour la forme phosphorylée ; utilisez toujours des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est de 147 kDa ; validez la spécificité de la bande en utilisant un blocage par peptide non phosphorylé ou des lysats traités à la phosphatase.
• Dans les applications ELISA, confirmez l'efficacité du revêtement et le titre de l'anticorps avec des contrôles de peptide phosphorylé versus non phosphorylé.
• Une réactivité croisée avec la souris a été rapportée ; vérifiez la réactivité dans votre souche de souris ou tissu spécifique, car les niveaux d'expression peuvent varier.
• Envisagez d'utiliser cet anticorps pour surveiller les voies de signalisation de l'insuline dans des modèles de résistance à l'insuline ou de diabète de type 2, en le combinant avec des anticorps anti-TBC1D4 totaux pour la normalisation.

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