Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-Syk (Y525/526) pour WB et ELISA - P43405

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SYK

• SYK (Spleen tyrosine kinase) est une tyrosine kinase non réceptrice qui médie la transduction du signal en aval d'une variété de récepteurs transmembranaires, régulant l'immunité innée et adaptative, l'adhésion cellulaire, la maturation des ostéoclastes, l'activation plaquettaire et le développement vasculaire. Références associées : PMID:12387735 PMID:33782605
• Essentielle pour la signalisation du récepteur des lymphocytes B (BCR), SYK est nécessaire à la maturation des lymphocytes B lors de la transition pro-B vers pré-B. Références associées : PMID:12456653
• Suite à l'engagement du BCR, SYK phosphoryle des adaptateurs clés tels que BLNK et des effecteurs comme PLCG1, reliant le récepteur activé aux voies de signalisation de la mobilisation du calcium et de la PKC.
• Dans le système immunitaire inné, SYK est activée par les récepteurs lectines de type C (par ex. CLEC7A) suite à une stimulation fongique, déclenchant la production d'ERO, l'activation de l'inflammasome et la transcription de cytokines médiée par NF-κB.
• SYK est requise pour la phagocytose neutrophilique stimulée par l'IL-15, soulignant son rôle dans la fonction des cellules myéloïdes. Références associées : PMID:15123770
• Au niveau subcellulaire, SYK se localise à la membrane cellulaire, dans le cytoplasme et le cytosol, se transloquant dynamiquement vers les récepteurs activés.
• Exprimée largement dans les cellules hématopoïétiques, avec une expression prédominante dans les lignées de lymphocytes B (des pro-B aux plasmocytes) et les neutrophiles. Références associées : PMID:8163536
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'autophosphorylation sur les résidus tyrosine 525 et 526 dans la boucle d'activation, ainsi que l'ubiquitination, qui régulent l'activité kinase et la stabilité protéique.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Étant donné que cet anticorps reconnaît spécifiquement la phosphorylation sur Tyr525 et Tyr526, assurez-vous que les lysats cellulaires sont préparés avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver la phosphorylation. Pour le Western blot, validez le signal en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ou en comparant des conditions stimulées vs non stimulées.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, envisagez d'utiliser un antigène de revêtement phospho-peptidique et un peptide de contrôle non phosphorylé pour confirmer la spécificité de phosphorylation.
• Les dilutions optimales de l'anticorps pour le WB doivent être déterminées empiriquement ; les dilutions de départ typiques pour les anticorps polyclonaux vont de 1:500 à 1:2000.
• Une réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas attendue d'après la conception de l'immunogène, mais n'a pas été vérifiée expérimentalement.

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