Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-STAT1 (S727) pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P42224

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de STAT1

• STAT1 (Signal transducer and activator of transcription 1) existe sous deux isoformes issues d'un épissage alternatif, STAT1-alpha (p91) et STAT1-beta (p84), qui diffèrent par leur domaine de transactivation C-terminal.
• En tant que médiateur clé de la signalisation des interférons (IFN), STAT1 est phosphorylé sur la tyrosine en réponse aux IFN de type I, hétérodimérise avec STAT2 et IRF9 pour former le complexe ISGF3, et induit l'expression de gènes antiviraux via les éléments ISRE. Références connexes : PMID:28753426, PMID:35568036
• Sous stimulation par l'IFN de type II (IFN-gamma), STAT1 est phosphorylé sur les résidus tyrosine et sérine, homodimérise en GAF, et se lie aux séquences GAS pour activer les gènes cibles. Références connexes : PMID:8156998, PMID:26479788
• La signalisation STAT1 est également déclenchée par KITLG/SCF et peut participer aux voies médiées par FGFR. Références connexes : PMID:15526160, PMID:19088846
• Dans l'immunité innée, l'endocytose de TLR4 lors de la stimulation par le LPS conduit à la phosphorylation dépendante d'IKBKB de STAT1 sur Thr-749, entraînant la transcription d'ARID5A et d'IL12B. Références connexes : PMID:32209697
• STAT1 est principalement cytoplasmique mais subit une translocation nucléaire lors de son activation ; son trafic subcellulaire est régulé par la phosphorylation et d'autres modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination.
• La phosphorylation de la sérine 727 dans le domaine de transactivation est essentielle pour une activité transcriptionnelle maximale, et l'anticorps reconnaît spécifiquement cette modification, permettant de disséquer la dynamique d'activation de STAT1.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser727 du STAT1 humain ; assurez-vous que la préparation des échantillons inclut des inhibiteurs de phosphatases pour préserver l'épitope phospho.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande près de 87 kDa ; un contrôle avec un anticorps STAT1 non phosphorylé peut aider à confirmer la spécificité phospho.
• En immunofluorescence (IF/ICC), optimisez la fixation et la perméabilisation pour équilibrer l'accessibilité de l'antigène et la conservation de l'épitope phospho ; la fixation au méthanol peut être bénéfique.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), testez soigneusement les conditions de récupération de l'antigène ; envisagez d'utiliser des contrôles phospho-spécifiques tels qu'un traitement à la phosphatase lambda.
• Lors de l'utilisation d'ELISA, une expérience de blocage avec un phosphopeptide peut valider la spécificité du signal.
• La réactivité croisée avec les STAT1 de souris et de rat est indiquée ; néanmoins, vérifiez les performances dans votre système modèle spécifique en raison de différences potentielles dépendantes de l'espèce dans la séquence ou la dynamique de phosphorylation.

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