Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Src-Y529 pour WB et ELISA - P12931

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Src

• Src est un proto-oncogène codant pour une tyrosine kinase non réceptrice activée par divers récepteurs, contrôlant la transcription des gènes, la réponse immunitaire, l'adhésion cellulaire, le cycle cellulaire, l'apoptose et la migration (PubMed:34234773). Références associées : PMID:34234773

• Dans les adhérences focales, Src phosphoryle PTK2/FAK1 et la paxilline suite à l'engagement des intégrines, régulant l'adhésion et la migration cellulaires (PubMed:21411625). Références associées : PMID:21411625

• Src contribue au remodelage du cytosquelette d'actine via la phosphorylation de l'AFAP1 et de la cortactine (CTTN).

• SRC médie l'internalisation de l'EGFR par phosphorylation de la chaîne lourde de la clathrine (CLTC) sur Tyr-1477 (PubMed:18586953). Références associées : PMID:18586953

• Dans les ostéoclastes, Src est essentiel à la résorption osseuse en formant un complexe avec PTK2B/PYK2 et en phosphorylant CBL pour activer la signalisation PI3K (PubMed:14585963, PubMed:8755529). Références associées : PMID:14585963 PMID:8755529

• Src se localise à la membrane cellulaire, aux adhérences focales, au cytoplasme, au cytosquelette, au noyau, à la membrane interne mitochondriale et à la région périnucléaire.

• Exprimée de manière ubiquitaire avec des niveaux les plus élevés dans les plaquettes, les neurones et les ostéoclastes ; également détectée dans la peau (PubMed:22294297). Références associées : PMID:22294297

• L'activité kinase de Src est étroitement contrôlée par phosphorylation, l'autophosphorylation sur Tyr-419 dans la boucle d'activation favorisant l'activité (Par similarité).

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, utilisez des conditions dénaturantes et réductrices ; le poids moléculaire attendu est d'environ 60 kDa. Incluez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation sur Y529.
• En ELISA, l'immunogène peptidique phosphorylé peut être utilisé comme antigène de revêtement, et la spécificité doit être confirmée par des tests parallèles avec un peptide de contrôle non phosphorylé.
• Validez la réactivité dans des lignées cellulaires humaines connues pour exprimer Src (par exemple, HeLa ou A549) dans des conditions stimulant la phosphorylation de Y529, comme la carence en sérum suivie d'un traitement au pervanadate.
• Optimisez les dilutions d'anticorps de manière empirique pour chaque application ; généralement, les dilutions de départ pour le WB vont de 1:500 à 1:2000, mais les concentrations de travail finales doivent être déterminées par les utilisateurs finaux.

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