Anticorps polyclonal anti-Phospho-SMO (S611/S615/S616) pour WB, ELISA - Q99835

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMO

• SMO est un récepteur couplé aux protéines G (RCPG) qui médie la voie de signalisation hedgehog, essentielle au développement embryonnaire et à la différenciation cellulaire.
  Références associées : PMID:19592253, PMID:27437577, PMID:28344083

• En l'absence de hedgehog, SMO est maintenu dans un état inactif par les protéines patched (PTCH1/PTCH2) qui restreignent l'accès au cholestérol. La liaison du ligand hedgehog à patched lève cette inhibition, permettant à SMO de transloquer vers la membrane du cil primaire où le cholestérol se lie et active SMO. Cela déclenche le couplage aux protéines G(i), inhibant l'adénylate cyclase et abaissant les niveaux intracellulaires d'AMPc.
  Références associées : PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• La réduction des niveaux d'AMPc atténue la suppression médiée par la protéine kinase A (PKA), favorisant la libération et la translocation nucléaire des facteurs de transcription GLI (GLI1, GLI2, GLI3), qui activent ensuite l'expression des gènes cibles.
  Références associées : PMID:31168089

• SMO actif supprime en outre l'activité de la PKA en se liant directement et en séquestrant sa sous-unité catalytique (PRKACA) au niveau de la membrane cellulaire, empêchant ainsi la phosphorylation et le traitement protéolytique des facteurs de transcription GLI.
  Références associées : PMID:36202993, PMID:39138140

• SMO favorise l'élimination de GPR161, un inhibiteur constitutif de la voie, des cils primaires, facilitant ainsi davantage la transduction du signal.

• SMO réside principalement au niveau de la membrane plasmique et de la membrane du cil primaire, ce qui correspond à son rôle dans la transduction du signal à ces carrefours de signalisation critiques.

• SMO subit des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, la glycosylation et la lipidation, qui contribuent à sa régulation et à sa localisation membranaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été produit contre un peptide synthétique phosphorylé couvrant les résidus S611, S615 et S616 ; il est supposé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée du SMO humain. Pour confirmation, envisagez de réaliser un traitement à la phosphatase ou de comparer avec un anticorps anti-SMO non phospho dans votre test.
• Les applications recommandées sont le Western blot (WB) et l'ELISA. Pour le WB, le poids moléculaire prédit est de 86 kDa ; validez l'anticorps en utilisant des lignées cellulaires ou des tissus humains pertinents connus pour exprimer le SMO actif.
• Étant donné que la phosphorylation de SMO est dynamique et augmente lors de l'activation de la voie hedgehog, une stimulation avec le sonic hedgehog (SHH) ou d'autres agonistes peut améliorer la sensibilité de détection dans vos expériences.
• La réactivité croisée est rapportée pour le SMO humain ; si vous utilisez des échantillons d'autres espèces, vérifiez au préalable l'homologie de séquence autour des sites de phosphorylation.

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