Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-Smad3-T179 pour WB, IHC-P, ELISA - P84022

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de SMAD3

• SMAD3 (membre 3 de la famille SMAD) est un SMAD régulé par un récepteur (R-SMAD) et un transducteur de signal intracellulaire, également connu sous le nom de JV15-2, homologue MAD 3 (Mad3) et hMAD-3. Il médie les réponses transcriptionnelles en aval des kinases des récepteurs du TGF-bêta et de l'activine.
• Lors de sa phosphorylation et de son activation par les kinases de récepteur de type 1, SMAD3 se lie à l'élément TRE dans les régions promotrices des gènes répondant au TGF-bêta et, en complexe avec SMAD4, active la transcription.
• De plus, SMAD3 peut former un complexe SMAD3/SMAD4/JUN/FOS sur les sites AP-1/SMAD pour réguler la transcription, intégrant ainsi les signaux TGF-bêta avec d'autres voies.
• SMAD3 joue un rôle inhibiteur dans la cicatrisation des plaies en modulant la croissance et la migration des kératinocytes, ainsi que la chimiotaxie des monocytes médiée par le TGF-bêta ; cet effet est sensible aux hormones.
• Il agit comme régulateur de la chondrogenèse et de l'ostéogenèse et inhibe la cicatrisation précoce des fractures osseuses.
• SMAD3 régule positivement l'activité de la kinase PDPK1 en favorisant sa dissociation de la protéine inhibitrice 14-3-3 YWHAQ.
• Au niveau sous-cellulaire, SMAD3 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, faisant la navette en réponse aux signaux de signalisation.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (par exemple au Thr179), l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'ubiquitination, qui modulent son activité et sa stabilité. Elle contient également des motifs de liaison au zinc et est sujette à l'épissage alternatif.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions spécifiques aux phosphoprotéines avec des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases et validez la spécificité à l'aide d'un contrôle de peptide non phosphorylé ou d'un traitement des échantillons à la phosphatase.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération d'antigène peut être nécessaire, et la coloration spécifique aux phosphoprotéines doit être confirmée par comparaison avec la coloration SMAD3 totale sur des sections adjacentes.
• Pour les applications ELISA, incluez une courbe standard de peptide phosphorylé et vérifiez avec un peptide non phosphorylé pour assurer la spécificité de la phosphorylation.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec le SMAD3 de souris et de rat, mais nous recommandons de valider l'homologie de la séquence cible et de réaliser des expériences pilotes dans le système d'échantillonnage pertinent.

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