Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Smad3 (S423/S425) pour WB, IHC-P, ELISA - P84022

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Phospho-Smad3 (S423/S425)

• SMAD3 (Mothers against decapentaplegic homolog 3) est une protéine SMAD régulée par récepteur (R-SMAD) qui agit comme transducteur de signal intracellulaire pour les voies du TGF-beta et de l'activine.
• Après phosphorylation sur S423 et S425 par les kinases réceptrices de type 1, SMAD3 forme un complexe avec SMAD4 et se transloque dans le noyau pour se lier à l'élément TRE, activant la transcription des gènes cibles.
• SMAD3 peut également former un complexe avec SMAD4, JUN et FOS au niveau des sites AP-1/SMAD, intégrant la signalisation TGF-beta à d'autres voies de signalisation.
• Il joue un rôle régulateur dans la cicatrisation, où il semble inhiber la croissance et la migration des kératinocytes, et altère la chimiotaxie des monocytes, avec des effets sensibles aux hormones.
• SMAD3 régule positivement l'activité kinase de PDPK1 en favorisant sa dissociation de la protéine inhibitrice 14-3-3 YWHAQ.
• La protéine est localisée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, naviguant entre les compartiments en réponse à la signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'ubiquitination, la phosphorylation au niveau du motif C-terminal SSXS étant critique pour l'activation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, utilisez des tampons de lyse phospho-spécifiques et ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pour préserver la phosphorylation S423/S425.
• Vérifiez la spécificité de la bande en traitant les lysats cellulaires avec de la lambda phosphatase ou en réalisant une compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Lors de la réalisation d'IHC-P, optimisez les conditions de récupération d'antigène et envisagez des méthodes de récupération d'épitopes phosphorylés.
• Pour l'ELISA, associez cet anticorps à un anticorps anti-SMAD3 total pour quantifier le rapport entre la protéine phosphorylée et la protéine totale.

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