Anticorps polyclonal Anti-Phospho-Smad2 (Ser467) pour WB, IHC-P, ELISA - Q15796

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMAD2

• SMAD2 (membre 2 de la famille SMAD), également connu sous les noms JV18-1, MADH2 ou hMAD-2, est un SMAD régulé par récepteur (R-SMAD) qui agit comme transducteur de signal intracellulaire et modulateur transcriptionnel en aval des kinases de récepteur de type 1 du TGF-bêta et de l'activine.
• Après liaison du ligand, SMAD2 est phosphorylé et forme un complexe avec SMAD4. Ce complexe se transloque dans le noyau, se lie à l'élément TRE des promoteurs des gènes cibles et active la transcription, régulant ainsi divers processus cellulaires.
• SMAD2 régule positivement l'activité kinase de PDPK1 en favorisant sa dissociation de la protéine inhibitrice 14-3-3 YWHAQ, influençant ainsi les voies de signalisation en aval.
• Il pourrait agir comme suppresseur de tumeur dans le cancer colorectal, comme l'ont suggéré des études fonctionnelles. Références associées : PMID:8752209
• SMAD2 favorise la transcription médiée par TGFB1 des gènes de différenciation odontoblastique dans les cellules de la papille dentaire, mettant en évidence son rôle dans la différenciation tissulaire spécifique.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique en l'absence de signal, mais après phosphorylation, la protéine se transloque dans le noyau. Elle navette entre le cytoplasme et le noyau de manière dépendante de sa phosphorylation.
• SMAD2 est largement exprimé, avec des niveaux élevés dans le muscle squelettique, les cellules endothéliales, le cœur et le placenta, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation cardiovasculaire et développementale.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (essentielle pour son activation), l'acétylation et l'ubiquitination. C'est également une phosphoprotéine fixant le zinc d'un poids moléculaire d'environ 52,3 kDa.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène utilisé était un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser467 du SMAD2 humain. Pour garantir la détection de la forme phosphorylée, il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de SMAD2 est d'environ 52 kDa. Observez des bandes à cette taille ; des bandes supplémentaires peuvent correspondre à des isoformes ou à des modifications post-traductionnelles.
• En immunohistochimie (IHC-P), optimisez les conditions de récupération d'antigène, car les anticorps spécifiques de la phosphorylation peuvent être sensibles aux méthodes de fixation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection phospho-spécifique ; son association avec un anticorps anti-Smad2 total peut permettre d'évaluer la stœchiométrie de la phosphorylation.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans l'espèce et le système d'échantillon concernés à l'aide de contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des lysats traités à la phosphatase pour le WB).

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