Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-Smad2-S250 pour WB, ELISA - Q15796

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Smad2

• SMAD2 (également connu sous le nom de JV18-1, MADR2, hMAD-2) est une SMAD régulée par les récepteurs (R-SMAD) et un transducteur de signal intracellulaire clé dans les voies de signalisation TGF-bêta et activine.
• Lors de la liaison du ligand, SMAD2 est phosphorylé par les kinases de récepteur de type 1, forme un complexe hétéromérique avec SMAD4, transloque dans le noyau et se lie à l'élément TRE pour réguler la transcription des gènes cibles.
• SMAD2 régule positivement l'activité de la kinase PDPK1 en favorisant sa dissociation de la protéine inhibitrice 14-3-3 YWHAQ.
• Il peut fonctionner comme un suppresseur de tumeur dans le carcinome colorectal. Références connexes : PMID:8752209
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau.
• Spécificité tissulaire : Exprimé à des niveaux élevés dans le muscle squelettique, les cellules endothéliales, le cœur et le placenta.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination ; la protéine contient également des domaines de liaison au zinc et subit un épissage alternatif.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la sérine 250 de Smad2 humain ; par conséquent, l'anticorps est spécifique de la forme phosphorylée à ce site. Vérifiez la spécificité en utilisant un traitement à la phosphatase ou des mutants déficients en phosphorylation.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser un anticorps Smad2 total comme témoin de chargement. Optimisez les conditions de blocage et de dilution de l'anticorps ; le blocage à base de BSA peut réduire le bruit de fond par rapport au lait lors de la détection de protéines phosphorylées.
• Pour ELISA, validez sur des lysats cellulaires traités au TGF-bêta par rapport à des lysats non traités pour confirmer la détection dépendante de l'activation. Les paires spécifiques de phospho-peptides peuvent nécessiter une optimisation minutieuse des conditions de capture et de détection.
• La réactivité croisée indiquée inclut l'humain et la souris ; pour d'autres espèces, vérifiez l'homologie de la séquence au site de phosphorylation et validez expérimentalement.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, il offre une haute affinité et des performances cohérentes d'un lot à l'autre, soutenant le développement d'essais robustes.

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