Ac Anti-Phospho-SMAD1-S463/S465+SMAD5-S463/S465+SMAD9-S465/S467 de Lapin pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SMAD1

• SMAD1 (Mothers against decapentaplegic homolog 1, également connu sous le nom de BSP1, JV4-1, MADH1) appartient à la famille des médiateurs intracellulaires des facteurs de transcription SMAD.
• Lors de la liaison du ligand BMP, SMAD1 est phosphorylé sur les résidus Ser463/465 par les récepteurs BMP de type I activés, puis forme un complexe avec SMAD4 et transloque dans le noyau. Références connexes : PMID:9335504 PMID:33667543
• Une fois dans le noyau, le complexe SMAD1/SMAD4 se lie aux éléments de liaison Smad (SBE) pour réguler la transcription des gènes cibles impliqués dans le développement embryonnaire, la différenciation cellulaire et l'homéostasie tissulaire.
• SMAD1 médie la dégradation du répresseur CREBBP/EP300 SNIP1 via un complexe OAZ1/PSMB4, ce qui module davantage l'expression génique (Par similitude).
• Au niveau subcellulaire, SMAD1 réside à la fois dans le cytoplasme et le noyau, sa translocation nucléaire étant dépendante de la phosphorylation induite par BMP.
• L'expression est ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés observés dans le cœur et le muscle squelettique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (activation), l'acétylation et l'ubiquitination ; la protéine possède également des motifs de liaison au zinc.
• Mots-clés d'UniProt : Structure 3D, Acétylation, Épissage alternatif, Liaison à l'ADN, Liaison aux métaux, Phosphoprotéine, Régulation de la transcription, Conjugaison Ubl, Zinc.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été élevé contre un peptide phospho-synthétique englobant le motif de phosphorylation conservé (SSVS) dans SMAD1, SMAD5 et SMAD9 ; envisagez de confirmer la spécificité en comparant des lysats cellulaires traités au BMP par rapport à des lysats non traités en Western blot.
• Pour le Western blot, chargez des lysats traités de manière appropriée et incluez des inhibiteurs de phosphatases lors lors de la préparation ; la taille de bande attendue est d'environ 52 kDa, mais la phosphorylation peut provoquer de légers décalages.
• Pour IHC-P et IF/ICC, validez l'anticorps avec des tissus/cellules de contrôle positifs et négatifs où la signalisation BMP est connue pour être active ou inactive ; la coloration nucléaire indique des complexes SMAD activés.
• Dans un ELISA, titrez l'anticorps contre des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour vérifier la spécificité phospho-spécifique.
• Une réactivité croisée est signalée pour l'humain, la souris et le rat ; assurez-vous de vérifier l'alignement des séquences spécifiques à l'espèce autour des sites de phosphorylation avant utilisation avec d'autres espèces.

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