Anti-Phospho-S6 Protéine Ribosomique (RPS6)-S240/244 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P62753

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPS6

• RPS6 code pour la protéine ribosomique S6 du 40S (également connue sous le nom de phosphoprotéine NP33), un composant central de la petite sous-unité ribosomique (40S).
• Essentielle pour le contrôle de la croissance et de la prolifération cellulaire via la traduction sélective de classes d'ARNm, en particulier ceux contenant des motifs 5' terminal oligopyrimidine (TOP). Références associées : PMID:17220279
• Lors de la biogenèse des ribosomes, RPS6 fait partie du processus de la petite sous-unité (SSU) dans le nucléole, contribuant au repliement, à la modification et au traitement du pré-ARNr. Références associées : PMID:34516797
• La localisation subcellulaire s'étend au cytoplasme, au noyau et au nucléole, reflétant ses doubles rôles dans la traduction des ARNm et l'assemblage des ribosomes.
• Sujette à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur plusieurs résidus (ex. Ser240/244), l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'hydroxylation ; la phosphorylation est clé pour la régulation de la traduction.
• Classée comme phosphoprotéine, ribonucléoprotéine et faisant partie du protéome de référence ; largement étudiée en tant qu'effecteur en aval de la signalisation mTOR.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que l'immunogène est un phospho-peptide synthétique correspondant à la Ser240 et Ser244 phosphorylées, l'anticorps est censé détecter spécifiquement RPS6 uniquement lorsqu'elle est doublement phosphorylée. Validez la spécificité en comparant les signaux de cellules traitées vs non traitées ou en utilisant un traitement à la phosphatase.
• Pour le Western blot, utilisez des tampons de lyse préservant la phosphorylation, complétés par des inhibiteurs de phosphatases. Optimisez la dilution de l'anticorps (ex. 1:500–1:2000) sur une lignée cellulaire pertinente stimulée par du sérum ou des facteurs de croissance pour induire la phosphorylation de RPS6.
• En immunohistochimie (IHC-P), les conditions de démasquage antigénique peuvent influencer l'accessibilité de l'épitope. Incluez toujours des contrôles positifs (tissu stimulé) et négatifs (peptide de blocage non phosphorylé).
• Pour l'immunoprécipitation (IP), envisagez de réticuler l'anticorps aux billes pour éviter l'interférence des chaînes lourdes/légères vers ~29 kDa. L'ELISA peut être utilisé pour quantifier la phospho-RPS6 dans les lysats cellulaires, mais confirmez la linéarité et la spécificité.

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