Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-RPS6KA5-S376 pour WB, IHC-P, ELISA - O75582

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPS6KA5

• RPS6KA5, également appelé MSK1 ou kinase 5 de la protéine ribosomale S6 de 90 kDa, est une sérine/thréonine-protéine kinase d'un poids moléculaire d'environ 90 kDa. Elle appartient à la famille RSK et joue un rôle essentiel dans la transduction de signaux depuis la surface cellulaire vers le noyau.
• Médie la phosphorylation induite par les mitogènes et le stress des facteurs de transcription CREB1 et ATF1, régulant ainsi leur activité transcriptionnelle. Ce processus se produit en réponse à des stimuli tels que l'UV-C, l'EGF et l'anisomycine. Références associées : PMID:11909979 PMID:9873047
• Essentiel pour le contrôle de l'activité transcriptionnelle de RELA (NF-kB p65) en réponse au TNF et aux glucocorticoïdes, contribuant à la répression de l'expression des gènes inflammatoires. Dans les myoblastes squelettiques, elle phosphoryle RELA au niveau du Ser-276 lors du stress oxydatif. Références associées : PMID:12628924 PMID:18511904
• Module directement la structure de la chromatine en phosphorylant l'histone H3 au niveau du Ser-10, et potentiellement du Ser-28, ainsi que l'histone H2A au niveau du Ser-1. La phosphorylation de l'histone H3 favorise l'activation transcriptionnelle des gènes immédiats précoces comme c-fos et c-jun. Références associées : PMID:12773393 PMID:15010469
• Phosphoryle et régule de nombreux autres substrats, notamment STAT3 (au niveau du Ser-727), le facteur de transcription ETV1/ER81 (au niveau des Ser-191 et Ser-216), la protéine HMGN1 à haute mobilité de groupe et l'ubiquitine ligase TRIM7 (au niveau du Ser-107). Références associées : PMID:12763138 PMID:12569367 PMID:25851810
• Il se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, ce qui lui permet de transduire les signaux des cascades de kinases cytoplasmiques vers les cibles nucléaires.
• Il est largement exprimé dans tous les tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur, le cerveau et le placenta ; des niveaux plus bas dans le poumon, le rein et le foie.
• Il intervient dans la régulation par rétroaction négative des réponses inflammatoires dans les macrophages en limitant la production de cytokines pro-inflammatoires via la voie TLR4, probablement par induction de DUSP1 et d'IL10.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant au Ser376 de RPS6KA5 humain. Cette conception permet probablement d'obtenir un anticorps spécifique de la forme phosphorylée ; il est recommandé de vérifier la spécificité en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase ou en utilisant un compétiteur non phosphopeptide lors des expériences de blocage.
• Pour les applications par Western blot (WB), ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver le signal de phosphorylation. La taille de la bande prédite est d'environ 90 kDa ; confirmez-la à l'aide de marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération d'antigène et la détection d'épitopes phospho-spécifiques peuvent nécessiter une optimisation. Utilisez des tissus témoins positifs connus avec une expression élevée de RPS6KA5, comme le cerveau ou le cœur.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'associer à un homologue non phospho-spécifique peut permettre une évaluation quantitative des niveaux de phosphorylation. Validez-le dans le système d'échantillon correspondant.

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