Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-RPA2 (T21) pour WB, ELISA - P15927

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPA2

• RPA2 (également connue sous le nom de REPA2, RPA32, RP-A p32, RP-A p34) est la sous-unité de 32 kDa du complexe hétérotrimérique de la protéine de réplication A (RPA), une protéine majeure de liaison à l'ADN simple brin.
• Le complexe RPA se lie et stabilise les intermédiaires d'ADN simple brin formés lors de la réplication de l'ADN ou en réponse à un stress génomique, empêchant leur réappariement et recrutant des protéines impliquées dans le métabolisme de l'ADN.
• Dans la réponse cellulaire aux dommages de l'ADN, RPA2 est essentielle pour recruter le complexe kinase ATRIP-ATR et des facteurs de réparation tels que RAD51, RAD52, XPA, XPG et SMARCAL1 sur la chromatine.
• RPA2 contribue à la réparation par excision de nucléotides (NER), à la réparation par excision de base (BER) via l'interaction avec UNG, et pourrait également jouer un rôle dans le maintien des télomères.
• RPA stimule l'activité hélicase 5'-3' de BRIP1/FANCJ, facilitant le redémarrage de la fourche de réplication et la réparation de l'ADN. Références associées : PMID:17596542
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire, avec un enrichissement dans les corps PML.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination (liaison isopeptidique, conjugaison Ubl), reflétant sa régulation dynamique.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes, et elle est identifiée comme une phosphoprotéine de protéomique de référence.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour de T21 de la RPA2 humaine ; l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée sur T21. Utilisez des contrôles appropriés (par exemple, peptide non phosphorylé ou lysats traités à la phosphatase) pour confirmer la spécificité.
• Pour l'analyse par western blot (WB), le poids moléculaire prédit de RPA2 est d'environ 29 kDa. Incluez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• L'anticorps a été appliqué en WB et ELISA. Optimisez les dilutions et les conditions pour votre système expérimental spécifique.
• Une réactivité croisée est rapportée avec des échantillons humains et de rat ; validez les performances dans d'autres espèces si nécessaire.
• Envisagez d'utiliser des extraits nucléaires ou des cellules endommagées à l'ADN pour améliorer la détection, étant donné la localisation nucléaire de RPA2 et son rôle dans la réponse aux dommages de l'ADN.

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