Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-RPA2-Ser33 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P15927

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Sous-unité de 32 kDa de la Protéine de Réplication A

• RPA2 est la sous-unité de 32 kDa du complexe hétérotrimérique de la protéine de réplication A (RPA), qui comprend également RPA1 (70 kDa) et RPA3 (14 kDa). Elle est également connue sous le nom de facteur de réplication A protéine 2 (RF-A protéine 2) et RP-A p34.
• Le complexe RPA se lie et stabilise l'ADN simple brin (ssDNA) lors de la réplication de l'ADN et après des dommages à l'ADN, empêchant la réassociation et recrutant des protéines clés pour le métabolisme de l'ADN.
• Dans la réponse aux dommages à l'ADN, RPA2 facilite le recrutement d'ATRIP, qui active la kinase ATR, un régulateur principal de la signalisation des points de contrôle.
• RPA2 est essentielle pour le recrutement de facteurs de réparation de l'ADN tels que RAD51, RAD52, XPA et XPG sur la chromatine aux sites de dommages à l'ADN, permettant la recombinaison homologue et la réparation par excision de nucléotides.
• Le complexe joue également un rôle dans la réparation par excision de bases (BER), probablement par interaction avec UNG, et stimule l'activité hélicase 5'-3' de BRIP1/FANCJ pour favoriser le redémarrage de la fourche de réplication. Références connexes : PMID:17596542
• RPA2 se localise principalement dans le noyau et peut être trouvée dans les corps nucléaires PML.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation à la Ser33, l'acétylation et l'ubiquitination, régulent les fonctions de RPA2 dans la réparation et la réplication de l'ADN.
• L'épissage alternatif de RPA2 produit plusieurs isoformes, contribuant à la diversité fonctionnelle.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Pour le Western blot (WB), validez la phospho-spécificité en comparant les signaux entre des échantillons traités et non traités ou en utilisant un traitement à la phosphatase lambda.
• En immunofluorescence (IF-P) et en immunohistochimie (IHC-P), optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver l'épitope phosphorylé, car une fixation excessive peut masquer la cible.
• Lors de l'utilisation d'ELISA, envisagez d'associer cet anticorps phospho-spécifique à un anticorps anti-RPA2 total pour normaliser le chargement en protéines et évaluer la stœchiométrie de la phosphorylation.
• Bien qu'il réagisse de manière croisée avec la RPA2 de souris et de rat, confirmez l'homologie de la séquence autour de la Ser33 chez ces espèces pour garantir une reconnaissance cohérente.

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