Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-RIPK1 (S166) pour WB et ELISA - Q13546

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la RIPK1

• La RIPK1 est une sérine-thréonine kinase qui agit comme un régulateur clé de l'apoptose médiée par le TNF, de la nécroptose et des voies inflammatoires [PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280]. Références associées : PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• L'activité kinase de la RIPK1 est essentielle pour réguler la mort cellulaire, y compris l'assemblage des complexes apoptotiques et nécroptotiques [PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513]. Références associées : PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• La RIPK1 a également des fonctions d'échafaudage indépendantes de son activité kinase, favorisant la survie cellulaire en activant NF-kappa-B lorsqu'elle est recrutée dans le complexe de signalisation du TNF-R1.
• Au cours du développement embryonnaire, la RIPK1 est nécessaire pour inhiber l'apoptose et la nécroptose, empêchant ainsi la mort cellulaire aberrante.
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et la membrane cellulaire.
• La RIPK1 subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment phosphorylation, ubiquitination et clivage protéolytique, qui dictent ses fonctions pro-survie ou pro-mort.
• La RIPK1 est impliquée dans la réponse inflammatoire, favorisant la production de cytokines pro-inflammatoires telles que l'IL-6 [PMID:31827280, PMID:31827281]. Références associées : PMID:31827280 PMID:31827281

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour de la Ser166 de la RIPK1 humaine ; l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la RIPK1 phosphorylée sur ce site.
• Pour le Western blot, induisez la phosphorylation de la RIPK1 en utilisant du TNF ou d'autres stimuli dans votre système expérimental avant la lyse. Envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse.
• Validez la spécificité en comparant les signaux d'échantillons traités par des phosphatases ou par compétition peptidique avec le peptide contrôle non phosphorylé.
• Pour l'ELISA, le phosphopeptide peut être utilisé comme antigène de coating ; confirmez la réduction du signal après déphosphorylation.
• Une réactivité croisée avec la souris est indiquée ; vérifiez la détection dans les tissus ou cellules de souris, et optimisez la dilution de l'anticorps pour chaque espèce.

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