Anticorps monoclonal de lapin Anti-Phospho-RIPK1 (S166) pour WB, ELISA - Q13546

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sérine/thréonine kinase 1 interagissant avec les récepteurs

• RIPK1, également connue sous le nom de RIP, RIP-1 ou protéine de mort cellulaire RIP, est une sérine-thréonine kinase codée par le gène RIPK1 ; l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes protéiques.
• Elle sert de régulateur clé de l'apoptose, de la nécroptose et des voies inflammatoires médiées par le TNF. Références associées : PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280.
• RIPK1 présente des fonctions dépendantes de l'activité kinase contrôlant la mort cellulaire et des fonctions d'échafaudage indépendantes de la kinase qui favorisent la signalisation inflammatoire et la survie cellulaire. Références associées : PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513.
• Lors de la stimulation par le TNF, RIPK1 est recrutée dans le complexe de signalisation TNF-R1 (complexe I) où elle agit comme un échafaudage pour activer la voie NF-κB canonique et promouvoir la survie cellulaire.
• L'activité kinase de RIPK1 entraîne l'assemblage de complexes inducteurs de mort : le complexe IIa (RIPK1-FADD-CASP8) pour l'apoptose et le complexe IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) pour la nécroptose.
• RIPK1 phosphoryle RIPK3, conduisant à une auto- et trans-phosphorylation réciproque. Références associées : PMID:19524513.
• Elle phosphoryle DAB2IP sur Ser-728, activant ainsi la cascade apoptotique MAP3K5-JNK. Références associées : PMID:15310755, PMID:17389591.
• Au niveau subcellulaire, RIPK1 se trouve dans le cytoplasme et est associée à la membrane cellulaire ; elle subit des phosphorylations, des ubiquitinations et d'autres modifications post-traductionnelles qui régulent ses fonctions de signalisation.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant aux résidus autour de la sérine 166 de la RIPK1 humaine ; ainsi, l'anticorps reconnaît spécifiquement la RIPK1 lorsqu'elle est phosphorylée sur ce site.
• Pour le Western blot, utilisez des lysats de lignées cellulaires ou de tissus humains, car l'anticorps est rapporté comme réagissant avec la RIPK1 humaine ; envisagez d'inclure des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation des conditions de revêtement et de détection de la RIPK1 phosphorylée dans les lysats cellulaires ou les protéines recombinantes ; validez avec des contrôles positifs et négatifs pour la phosphorylation.
• Le poids moléculaire prédit de RIPK1 est d'environ 75 kDa ; cependant, les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner de légers décalages de migration.

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