Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-RB (Ser780) pour WB, IHC-P, ELISA - P06400

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RB1

• La protéine associée au rétinoblastome (RB1) est un suppresseur de tumeur et un régulateur clé de la transition G1/S du cycle cellulaire. Elle agit en se liant aux facteurs de transcription E2F, réprimant la transcription des gènes nécessaires à l'entrée en phase S. Références associées : PMID:10499802
• La phosphorylation de RB1 par les kinases dépendantes des cyclines (CDK) entraîne sa dissociation d'E2F, activant ainsi la transcription et favorisant la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:10499802
• RB1 facilite également la transition G0-G1 suite à sa phosphorylation par CDK3/cycline-C. Références associées : PMID:15084261
• Impliquée directement dans la formation de l'hétérochromatine en maintenant la structure de la chromatine et en stabilisant la méthylation des histones, recrutant des méthyltransférases d'histones comme SUV39H1.
• La localisation subcellulaire inclut le noyau et le cytoplasme, ce qui correspond à ses rôles dans la régulation transcriptionnelle et le contrôle du cycle cellulaire.
• Exprimée dans la rétine et les kératinocytes du prépuce, avec une large distribution tissulaire reflétant sa fonction fondamentale dans le cycle cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation, qui modulent son activité et ses interactions. Sa perturbation par des oncoprotéines virales (ex. : antigène T du SV40, E7 du HPV) illustre son rôle central dans le contrôle de la croissance.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour de la Ser780 de la RB humaine. Pour confirmer la spécificité phospho, incluez des lysats traités à la phosphatase ou faites compétition avec un peptide non phosphorylé dans votre test.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 106 kDa en conditions réductrices. Utilisez des contrôles positifs (ex. : cellules en cycle) et négatifs (ex. : cellules privées de sérum ou déficientes en RB) appropriés pour vérifier l'identité de la bande.
• En IHC-P, les conditions de démasquage antigénique (ex. : tampon citrate pH 6.0 ou EDTA pH 9.0) et la dilution de l'anticorps doivent être optimisées selon le type de tissu. Une co-marquage avec un anticorps anti-RB totale peut aider à évaluer l'état de phosphorylation dans le contexte tissulaire.
• Il est rapporté que l'anticorps présente une réactivité croisée avec la RB de souris et de rat ; cependant, une validation dans l'espèce et le système expérimental pertinent est recommandée.
• Pour l'ELISA, envisagez de revêtir avec le peptide phosphorylé et de vérifier la spécificité contre le peptide non phosphorylé.

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