Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-RB-S780 pour IHC-P, ELISA - P06400

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine associée au rétinoblastome (RB1)

• RB1, ou protéine associée au rétinoblastome, est un suppresseur de tumeur qui régule étroitement le point de contrôle du cycle cellulaire G1/S en se liant aux facteurs de transcription E2F et en les inhibant (PubMed:10499802). Références associées : PMID:10499802
• La phosphorylation de RB1 par les kinases dépendantes des cyclines (CDK), y compris sur Ser780, conduit à sa dissociation d'E2F, déréprimant ainsi les gènes essentiels à l'entrée en phase S (PubMed:10499802). Références associées : PMID:10499802
• La phosphorylation par CDK3/cycline‑C entraîne également la transition G0‑G1 (PubMed:15084261). Références associées : PMID:15084261
• RB1 contribue à la stabilité de l'hétérochromatine en recrutant des méthyltransférases d'histones (SUV39H1, KMT5B/C) et en contrôlant la triméthylation de H4K20.
• Au niveau subcellulaire, RB1 est principalement nucléaire mais peut transiter vers le cytoplasme ; elle est exprimée dans la rétine et les kératinocytes.
• Des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation affinent son activité répresseur et ses interactions protéiques.
• Les oncoprotéines virales (grand T du SV40, E7 du HPV, E1A de l'adénovirus) perturbent les complexes RB1‑E2F, abolissant la fonction suppressive de tumeur.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phospho‑synthétique englobant Ser780 de la RB1 humaine. Pour l'IHC‑P, envisagez d'utiliser une récupération antigénique et des inhibiteurs de phosphatases pour préserver la phosphorylation.
• Confirmez la spécificité en comparant la coloration avec un anticorps RB1 non phospho‑spécifique ou par traitement à la phosphatase.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la souris et le rat ; validez-le dans le modèle tissulaire ou cellulaire approprié pour votre étude.
• Pour l'ELISA, incluez des contrôles avec des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour évaluer la spécificité phospho.
• Comme RB1 est une protéine nucléaire, des étapes d'enrichissement nucléaire peuvent améliorer la sensibilité de détection.

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