Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-PPP2CA/PPP2CB-Y307 pour WB, ELISA - P67775 / P62714

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PPP2CA/PPP2CB

• PPP2CA code pour l'isoforme alpha de la sous-unité catalytique de la sérine/thréonine protéine phosphatase 2A (PP2A), une enzyme clé qui régule de nombreuses voies de signalisation et processus cellulaires.
• PP2A est la principale phosphatase pour les protéines associées aux microtubules (MAP) et module des kinases telles que la phosphorylase B kinase, la caséine kinase 2 et la MAP-2 kinase (PubMed:22613722). Références associées : PMID:22613722
• Elle déphosphoryle un large éventail de substrats, notamment l'antigène grand T du SV40, AXIN1, p53/TP53, PIM3, WEE1, MYC, FOXO3 et AKT1, contrôlant ainsi la croissance cellulaire, l'apoptose et les réponses immunitaires (PubMed:10801873, PubMed:12473674, PubMed:17245430, PubMed:25438055, PubMed:30513302). Références associées : PMID:10801873, PMID:12473674, PMID:17245430, PMID:25438055, PMID:30513302
• PP2A est un composant essentiel des complexes STRIPAK, qui régulent les voies Hippo, MAPK, des récepteurs nucléaires et de remodelage du cytosquelette impliquées dans la croissance et la différenciation cellulaire (PubMed:33633399). Références associées : PMID:33633399
• En tant que partie du complexe Integrator-PP2A (INTAC), PPP2CA déphosphoryle le domaine C-terminal de l'ARN polymérase II et SUPT5H/SPT5, médiant la terminaison précoce de la transcription et le contrôle qualité pendant l'élongation (PubMed:33243860, PubMed:34004147, PubMed:37080207). Références associées : PMID:33243860, PMID:34004147, PMID:37080207
• Il se localise dans le cytoplasme, le noyau, les centromères et les pôles du fuseau mitotique, ce qui reflète ses fonctions diversifiées dans la mitose, la méiose et la régulation transcriptionnelle.
• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination, et contient des sites de liaison pour les ions fer, manganèse et zinc.

Conseils expérimentaux et techniques

• Étant donné que l'immunogène est un peptide synthétique phosphorylé au niveau du résidu Y307, assurez-vous que les tampons de blocage et de détection sont optimisés pour les anticorps phospho-spécifiques afin de préserver la reconnaissance de l'épitope.
• Pour le Western blot, traitez les échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver l'état de phosphorylation ; incluez un contrôle positif (par exemple, des cellules traitées au pervanadate) pour confirmer la spécificité vis-à-vis de la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, envisagez de fixer sur le puits le peptide phosphorylé et d'utiliser un anticorps secondaire anti-lapin pour la détection. Validez la réactivité croisée avec les échantillons de souris comme indiqué.
• Lors d'un WB, le poids moléculaire attendu de PPP2CA est d'environ 36 kDa ; notez que PPP2CB peut migrer de manière similaire.

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