Anticorps polyclonal de lapin Anti-Phospho-PPP1CA (T320) pour WB, IHC-P, ELISA - P62136

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PPP1CA

• Identité de la protéine et formation d'holoenzyme : Sous-unité catalytique de la sérine/thréonine protéine phosphatase PP1-alpha qui s'associe à plus de 200 protéines régulatrices pour former des holoenzymes spécifiques de substrats, qui déphosphorylent des centaines de cibles biologiques (PubMed:28216226, 30158517, 35768504).
  Références associées : PMID:28216226, PMID:30158517, PMID:35768504

• Fonctions cellulaires principales : Essentiel pour la division cellulaire, l'élongation de la transcription, le métabolisme du glycogène, la contractilité musculaire et la synthèse protéique (PubMed:35768504, 35830882, 35831509). Régule également les conductances ioniques, la plasticité synaptique à long terme et la déphosphorylation post-synaptique de CaMKII.
  Références associées : PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509

• Régulation transcriptionnelle via le complexe PNUTS-PP1 : Composant catalytique du complexe PNUTS-PP1 qui médie la pause-relâchement et la terminaison de l'ARN polymérase II en déphosphorylant des facteurs comme AFF4, CDK9, SUPT5H (PubMed:39603239, 39603240, 31677974). Il favorise également la dégradation de l'ARNPol II en cas de stress de réplication et régule la structure de la chromatine lors de la transition mitose-interphase (PubMed:33264625, 20516061).
  Références associées : PMID:39603239, PMID:39603240, PMID:31677974, PMID:33264625, PMID:20516061

• Localisation subcellulaire : Présent dans le cytoplasme, le noyau (nucléoplasme et nucléole), et au niveau de la densité post-synaptique, ce qui est cohérent avec ses divers rôles régulateurs.

• Modifications post-traductionnelles et liaison aux métaux : C'est une phosphoprotéine acétylée qui requiert du manganèse (Mn²⁺) comme cofacteur pour son activité hydrolase.

• Implication dans les voies de signalisation clés : Agit comme phosphatase principale du complexe SHOC2-MRAS-PP1c (SMP) pour déphosphoryler et activer les kinases RAF, stimulant la voie MAPK (PubMed:35768504, 35830882, 35831509, 36175670). Il déphosphoryle également FOXP3 dans les cellules Treg, CENPA, ATG16L1, ainsi que les capteurs immunitaires innés IFIH1/MDA5 et RIG-I (PubMed:23396208, 25556658, 26083323, 23499489).
  Références associées : PMID:35768504, PMID:36175670, PMID:23396208, PMID:25556658, PMID:26083323, PMID:23499489

• Rôles biologiques supplémentaires : Régule le rythme circadien en équilibrant l'activité CSNK1D/E et la phosphorylation de PER (PubMed:21712997). Il est également impliqué dans le développement embryonnaire (fermeture du tube neural, fermeture de la fissure optique, migration des cellules de crête neurale ; par similarité) et nécessaire à la réplication des alphavirus.
  Références associées : PMID:21712997

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été produit contre un peptide phosphorylé synthétique autour de Thr320 de la PPP1CA humaine ; la détection spécifique de la PPP1CA phosphorylée sur ce site nécessite que la phosphorylation soit conservée pendant la préparation de l'échantillon. Il est recommandé d'ajouter des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 38 kDa ; une bande de taille proche est attendue dans les échantillons pertinents. Des bandes non spécifiques peuvent apparaître selon le type d'échantillon et la concentration de l'anticorps ; l'optimisation de la dilution de l'anticorps primaire est recommandée.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est attendue sur la base de la conservation de la séquence ; cependant, une validation sur l'espèce et le tissu cible est conseillée avant des études quantitatives.
• Pour l'IHC-P, les conditions de récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être optimisées selon le type de tissu. Pour l'ELISA, il est recommandé d'utiliser un contrôle de peptide non phosphorylé pour confirmer la spécificité.

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