Anticorps Polyclonal Anti-Phospho-POLR2A CTD-S2 pour WB, IP, ELISA - P24928

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de POLR2A (Sous-unité RPB1 de l'ARN polymérase II dirigée par l'ADN)

• POLR2A code la plus grande sous-unité catalytique de l'ARN polymérase II (Pol II), une ARN polymérase dépendante de l'ADN responsable de la synthèse des précurseurs d'ARNm et de nombreux ARN non codants fonctionnels (PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474). Références connexes : PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• Conjointement avec la deuxième plus grande sous-unité POLR2B, elle forme le centre actif de la Pol II, ajoutant des nucléotides à l'ARN naissant et fournissant une relecture par une activité exonucléase 3'->5' (PubMed:30190596, PubMed:8381534, PubMed:9852112). Références connexes : PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• Le domaine C-terminal unique (CTD) est constitué de 52 répétitions en tandem d'heptapeptides (YSPTSPS) et sert de plateforme dynamique pour l'assemblage de facteurs régulant l'initiation, l'élongation, la terminaison de la transcription et le traitement co-transcriptionnel de l'ARNm. La phosphorylation sur la Ser5 favorise l'évasion du promoteur, tandis que la phosphorylation sur la Ser2 est critique pour la libération de la pause et l'élongation productive (PubMed:24207025, PubMed:26124092). Références connexes : PMID:24207025 PMID:26124092
• En plus de l'activité ARN polymérase dépendante de l'ADN, POLR2A possède une fonction d'ARN polymérase dépendante de l'ARN, étendant les ARN non codants et participant à la réplication virale, par exemple avec le virus de l'hépatite delta.
• Les modifications post-traductionnelles de POLR2A incluent la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui ajustent finement son activité et ses interactions.
• POLR2A se localise principalement dans le noyau mais peut également être trouvée dans le cytoplasme et associée aux chromosomes, reflétant ses rôles dans la transcription et au-delà.
• Le poids moléculaire calculé est d'environ 217 kDa.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phospho-synthétique correspondant à la Ser2 de la répétition CTD du POLR2A humain ; la spécificité de l'anticorps doit être confirmée en utilisant des lysats traités à la phosphatase ou un peptide bloquant non phosphorylé.
• Pour les applications de Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatase appropriés dans les tampons de lyse et d'échantillon pour préserver le signal de phosphorylation.
• Lors de l'immunoprécipitation, assurez-vous que la composition du tampon de lyse maintient l'intégrité de l'épitope phospho ; le pré-nettoyage des lysats peut réduire les liaisons non spécifiques.
• Pour l'ELISA, le revêtement avec le peptide phospho-immunisant et la détection avec cet anticorps peuvent être utilisés pour évaluer la liaison spécifique au phospho ; envisagez la réactivité croisée avec des contrôles de peptides non phosphorylés.
• Cet anticorps peut également reconnaître d'autres protéines avec des motifs phospho similaires ; validez dans le système d'échantillon pertinent.

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