Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-PLK1-T210 pour WB et ELISA - P53350

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PLK1

• La sérine/thréonine-protéine kinase PLK1, également connue sous le nom de polo-like kinase 1 et STPK13, est un régulateur principal de multiples événements lors de la mitose, notamment la maturation des centrosomes, l'assemblage du fuseau, la transition G2/M, la fonction des kinétochores, la cohésion des chromatides sœurs, la sortie mitotique et la cytocinèse. Références associées : PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Au niveau du centrosome, PLK1 phosphoryle des substrats clés tels que KIZ, NEDD1 et NINL pour favoriser le recrutement du complexe de l'anneau de γ-tubuline et la formation du fuseau bipolaire. Références associées : PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Lors de la sortie mitotique et de la cytocinèse, PLK1 crée ses propres sites d'amarrage sur les protéines du fuseau central (PRC1, KIF20A/MKLP2) et phosphoryle ECT2, CEP55 et RACGAP1 pour orchestrer la formation du sillon de clivage. Références associées : PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Régulateur critique du point de contrôle G2/M, PLK1 active CDK1 en phosphorylant CDC25C, la cycline B1 et le facteur de transcription FOXM1, tout en inhibant simultanément les régulateurs négatifs WEE1 et PKMYT1/MYT1. Références associées : PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Au niveau du kinétochore, PLK1 maintient la signalisation du point de contrôle d'assemblage du fuseau et la cohésion des chromatides sœurs en phosphorylant BUB1B/BUBR1, FBXO5/EMI1, STAG2/SA2 et SGO1. Références associées : PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:18331714
• Au-delà de la mitose, PLK1 contribue à la récupération après des dommages à l'ADN et à l'atténuation des points de contrôle en phosphorylant MRE11, RAD51, POLQ et RHNO1, et régule négativement la stabilité de p53 via la signalisation TOPORS. Références associées : PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:37440612, PMID:37674080, PMID:19473992
• PLK1 se localise dans le noyau, le centrosome, le kinétochore, le fuseau et le corps mitotique central au cours de la division cellulaire, et est fortement exprimé dans le placenta et le côlon. Il est classé comme une phosphoprotéine et une sérine/thréonine-protéine kinase ayant des rôles dans le cycle cellulaire et la division cellulaire (UniProt KB - P53350).

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide phospho-synthétique autour du résidu Thr210 ; par conséquent, il reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée de PLK1. Confirmez la spécificité du signal en traitant les lysats avec la λ-phosphatase ou en utilisant des mutants Thr210 non phosphorylables.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 68 kDa, mais le phospho-PLK1 mitotique peut présenter des décalages de mobilité. Utilisez des lysats de cellules arrêtées en mitose (par exemple, traitement au nocodazole) comme témoin positif, et des cellules en interphase comme témoin négatif.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection pour quantifier les niveaux de phospho-PLK1 (Thr210). Optimisez le tampon de revêtement, la concentration de l'anticorps et le substrat de détection pour votre format de plaque spécifique.
• La réactivité croisée n'a été validée qu'avec le PLK1 humain. Lorsque vous travaillez avec d'autres espèces, vérifiez l'homologie de la séquence autour de l'épitope Thr210 et confirmez la réactivité expérimentalement.
• Pour préserver l'intégrité de l'épitope phospho, manipulez les échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases et évitez le stockage prolongé des lysats enrichis en phosphoprotéines.

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