Anticorps monoclonal anti-Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) pour WB, IHC-P, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC (pan)

• La protéine kinase C alpha (PRKCA) est une sérine/thréonine-protéine kinase dépendante du calcium, des phospholipides et du diacylglycérol (DAG) qui régule divers processus cellulaires, notamment la prolifération, l'apoptose, la différenciation, la migration et l'adhésion.
• Elle joue un rôle dans la migration des lymphocytes T induite par les chimiokines en phosphorylant DOCK8, ce qui conduit à l'activation de CDC42. Références associées : PMID:28028151
• PRKCA est impliquée dans la signalisation de l'angiotensine II en phosphorylant KLHL3, modulant les interactions avec WNK4 et la régulation de la pression artérielle. Références associées : PMID:25313067
• Elle phosphoryle LRRK1, qui à son tour phosphoryle les protéines RAB impliquées dans le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:36040231
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau, en fonction du contexte cellulaire et des stimuli.
• La famille PKC comprend plusieurs isoformes ; cet anticorps, généré contre un peptide phosphorylé autour de Ser660 de PRKCA, reconnaît les formes phosphorylées de plusieurs isoformes de PKC (alpha, bêta, delta, epsilon, eta, theta) en raison de la conservation de séquence dans le motif de retournement.
• PKC alpha contient des domaines régulateurs C1 et C2, notamment des motifs à doigt de zinc liant les esters de phorbol/DAG, et est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation et l'acétylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), validez l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique ; envisagez une induction avec des esters de phorbol (par exemple PMA) pour stimuler la phosphorylation de PKC.
• Pour l'immunohistochimie (IHC) sur coupes de paraffine (IHC-P), les conditions de récupération d'antigène peuvent nécessiter une optimisation ; les anticorps phospho-spécifiques nécessitent souvent une récupération douce pour préserver la phosphorylation.
• Pour ELISA, utilisez l'anticorps pour détecter la phospho-PKC (pan) dans des lysats cellulaires ou des protéines purifiées ; ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation de l'échantillon pour maintenir la phosphorylation.
• Confirmez la spécificité en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase ou en utilisant une compétition par peptide non phosphorylé.

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