Anti-Phospho-PKC (pan) (gamma)-T514 pAb de lapin pour WB et ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P05129 / P24723 / Q04759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC (pan) (gamma)-T514

• Les membres de la famille des protéines kinase C (PKC) sont des sérine/thréonine kinases activées par le calcium, le diacylglycérol (DAG) et les phospholipides, qui régulent divers processus cellulaires, notamment la prolifération, l'apoptose, la différenciation et la migration.
• PKC alpha (PRKCA), une isoforme représentative largement exprimée, est impliquée dans la régulation positive et négative du cycle cellulaire : elle peut promouvoir la croissance cellulaire via la signalisation RAF1/ERK ou induire l'arrêt de la croissance par l'intermédiaire des inhibiteurs de CDK.
• Elle exerce des fonctions anti-apoptotiques en phosphorylant BCL2 et en supprimant l'activation d'IGFBP3 médiée par p53/TP53, et est fortement exprimée dans de nombreux cancers où elle peut agir comme promoteur tumoral.
• Elle subit une translocation dépendante du stimulus entre le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau, permettant une signalisation spécifique du contexte.
• Dans la fonction cardiaque, PKC alpha régule l'hypertrophie des cardiomyocytes, la contractilité myocardique et la progression de l'insuffisance cardiaque ; elle phosphoryle la troponine T cardiaque (TNNT2) pour moduler la sensibilité au calcium.
• Dans l'angiogenèse, elle est nécessaire à la migration des cellules endothéliales, à l'adhésion à la vitronectine et à la signalisation induite par VEGFA, stabilisant l'ARNm de VEGFA post-transcriptionnellement.
• Cet anticorps reconnaît spécifiquement les protéines PKC phosphorylées au niveau du résidu thréonine 514 conservé (T514 dans PKC alpha ; sites de boucle d'activation équivalents dans les isoformes beta, delta, epsilon, gamma, eta et theta), qui est essentiel pour l'activité kinase complète.
• Elle phosphoryle KLHL3 au niveau du Ser-52 en réponse à la signalisation de l'angiotensine II, diminuant l'interaction entre KLHL3 et WNK4. Références associées : PMID:25313067
• Elle phosphoryle DOCK8, entraînant sa dissociation de LRCH1 et l'activation subséquente de la GTPase CDC42 lors de la migration des lymphocytes T induite par les chimiokines. Références associées : PMID:28028151
• Elle phosphoryle LRRK1, qui phosphoryle à son tour les protéines RAB impliquées dans le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:36040231

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de T514 de la PKC alpha humaine ; cette conception cible l'épitope spécifique de la phosphorylation sur plusieurs isoformes de PKC.
• Pour le Western blot, ajoutez des inhibiteurs de phosphatase dans les tampons de lyse et de lavage pour préserver la phosphorylation, et envisagez d'utiliser des solutions de blocage à base de BSA pour réduire la liaison non spécifique.
• La détection par ELISA peut être effectuée sur des lysats cellulaires ou tissulaires ; optimisez les conditions de revêtement et de détection pour les phosphoprotéines, et validez la spécificité à l'aide de contrôles de peptide non phosphorylé.
• Comme l'anticorps reconnaît plusieurs isoformes de PKC, les réponses spécifiques d'isoforme doivent être vérifiées à l'aide de lignées cellulaires knock-out pertinentes ou d'inhibiteurs sélectifs d'isoforme.
• Les bandes prédites peuvent varier de 59 à 83 kDa selon l'isoforme ; confirmez le poids moléculaire dans le système d'échantillon qui vous intéresse.

CamelBio : votre plateforme d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio fournit cet anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-PKC (pan) (gamma)-T514 dans le cadre de notre vaste portefeuille de matières premières pour le diagnostic in vitro dédié à la recherche sur la signalisation des kinases et les maladies. Nous sommes spécialisés dans la fourniture de paires d'anticorps validées, d'anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés et de réactifs annexes en vrac, ce qui simplifie votre développement, du concept à la clinique. Notre plateforme tout-en-un facilite l'accès aux matières premières pour cibles rares et au conseil technique, accompagnant les fabricants de diagnostics et les laboratoires de recherche du monde entier.