Anticorps polyclonal de lapin anti-PKC alpha phospho (S319) pour WB et ELISA - P17252

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC alpha

• PKC alpha est une sérine/thréonine kinase dépendante du calcium, du DAG et des phospholipides (gène PRKCA) qui agit comme régulateur clé de la prolifération cellulaire, de la différenciation et de l'apoptose.
• Elle module la voie MAPK/ERK en phosphorylant RAF1, et exerce des effets anti-apoptotiques via la phosphorylation de BCL2 et la suppression de l'IGFBP3 induit par p53/TP53.
• PKC alpha joue un double rôle dans le cancer : elle favorise la tumorigenèse dans les gliomes et les cancers du sein, mais induit l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules intestinales.
• Dans le système cardiovasculaire, elle phosphoryle la troponine T cardiaque (TNNT2), réduisant la sensibilité au calcium des myofilaments et la contractilité myocardique, et favorise l'angiogenèse et l'agrégation plaquettaire.
• Pendant la migration des lymphocytes T dirigée par les chimiokines, PKC alpha phosphoryle DOCK8, entraînant sa dissociation de LRCH1 et l'activation de CDC42 (PubMed:28028151). Références associées : PMID:28028151
• Elle phosphoryle KLHL3 en réponse à l'angiotensine II, modulant les interactions avec WNK4 et le transport ionique (PubMed:25313067). Références associées : PMID:25313067
• PKC alpha active LRRK1, qui phosphoryle les protéines RAB, régulant ainsi le trafic vésiculaire intracellulaire (PubMed:36040231). Références associées : PMID:36040231
• La protéine navette entre le cytoplasme, la membrane plasmique, la mitochondrie et le noyau ; sa localisation majoritairement cytosolique est modifiée lors de l'activation, et la phosphorylation est un mécanisme régulateur clé.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la Ser319. Par conséquent, cet anticorps est supposé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée de PKC alpha ; validez sa spécificité dans votre système d'échantillons en comparant les signaux entre les lysats stimulés et non stimulés ou en utilisant un traitement à la phosphatase.
• Pour le Western blotting, prévoyez de charger des lysats totaux de cellules de lignées humaines, murines ou de rat connues pour exprimer PKC alpha, et utilisez des conditions de blocage et de lavage appropriées pour minimiser la liaison non spécifique.
• En ELISA, assurez-vous d'optimiser le tampon de revêtement d'antigène et la concentration ; l'anticorps peut être utilisé pour la détection de phosphopeptides dans des formats compétitifs ou directs.
• Incluez toujours des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, cellules stimulées vs cellules non traitées) pour la détection phospho-spécifique.

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