Anticorps monoclonal lapin anti-Phospho-PERK (T982) pour WB, IHC-P, ELISA - Q9NZJ5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PERK

• EIF2AK3/PERK est une kinase de détection du stress métabolique qui phosphorylate eIF2-alpha (EIF2S1) sur Ser51 en réponse au stress du réticulum endoplasmique (RE), une étape centrale de la réponse aux protéines mal repliées (UPR).
  Références associées : PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• La phosphorylation d'eIF2-alpha par PERK inhibe la traduction globale dépendante de la coiffe tout en améliorant sélectivement la traduction des ARNm sensibles au stress tels qu'ATF4 et QRICH1, permettant une reprogrammation cellulaire en situation de stress.
  Références associées : PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• L'UPR médiée par PERK améliore la phosphorylation oxydative mitochondriale en favorisant l'expression dépendante d'ATF4 de COX7A2L/SCAF1, ce qui augmente la formation de super-complexes de la chaîne respiratoire.
  Références associées : PMID:31023583
• PERK est inhibé aux sites de contact mitochondrie-RE par ATAD3A, protégeant ainsi les mitochondries de l'arrêt traductionnel global de l'UPR.
  Références associées : PMID:39116259
• Outre eIF2-alpha, PERK phosphoryle également NFE2L2/NRF2, déclenchant sa libération de KEAP1 et son accumulation nucléaire ultérieure pour activer l'expression des gènes antioxydants.
• PERK est une protéine transmembranaire résidente du RE et est exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans les tissus sécréteurs.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 125 kDa et appartient à la famille des kinases de protéines Ser/Thr, avec une activité kinase tyrosine supplémentaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été développé contre un phosphopeptide synthétique correspondant au site de phosphorylation Thr982 du PERK humain ; il reconnaît spécifiquement la PERK phosphorylée et ne détectera pas la forme non phosphorylée. Vérifiez la spécificité de la phosphorylation dans votre système expérimental, par exemple par un traitement à la phosphatase.
• Pour le western blot (WB), une bande d'environ 125 kDa est attendue. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps pour minimiser la liaison non spécifique, et envisagez de charger des témoins appropriés (par exemple, lysats cellulaires induits par stress vs non stressés).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération de l'antigène peuvent influencer la coloration ; validez avec des échantillons de tissus positifs et négatifs connus et envisagez d'utiliser un protocole de détection spécifique à la phosphorylation.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec le PERK de souris et de rat, permettant des études translationnelles ; cependant, confirmez la réactivité dans vos tissus ou lignées cellulaires spécifiques, car le statut de phosphorylation peut varier.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de détection ou de capture, mais les conditions de l'essai (enrobage, blocage, méthode de détection) doivent être optimisées pour la détection spécifique de la phosphorylation.

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