Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-PDHA1-S293 pour WB et ELISA - P08559

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de PDHA1

• PDHA1 code la forme somatique de la sous-unité alpha de la pyruvate déshydrogénase E1, un complexe enzymatique clé qui relie la glycolyse cytoplasmique à la production d'énergie mitochondriale.
• Avec PDHB, l'hétérotétramère E1 (α₂β₂) catalyse la décarboxylation dépendante du thiamine pyrophosphate (TPP) du pyruvate et l'acétylation réductrice subséquente du composant E2 porteur de lipoïle, une étape critique dans la conversion du pyruvate en acétyl‑CoA et CO₂. Références associées : PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• Le complexe PDH réside dans la matrice mitochondriale, où PDHA1 est localisée pour faciliter le couplage direct avec le cycle de l'acide tricarboxylique (TCA).
• PDHA1 est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, ce qui correspond à son rôle central dans le métabolisme du glucose.
• La protéine est sujette à des modifications post-traductionnelles régulatrices, notamment la phosphorylation sur plusieurs résidus sérine et l'acétylation, qui modulent l'activité enzymatique.
• Les mutations associées à des maladies dans PDHA1 sont liées au syndrome de Leigh et à d'autres troubles mitochondriaux primaires, soulignant son importance métabolique.
• En tant que membre de la famille de la pyruvate déshydrogénase, PDHA1 nécessite le thiamine pyrophosphate (dérivé de la vitamine B1) et le magnésium comme cofacteurs pour son activité catalytique.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'anticorps est produit contre un peptide phosphorylé correspondant aux résidus entourant la Ser293 de la PDHA1 humaine. Pour des résultats optimaux, envisagez d'utiliser des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse cellulaire/tissulaire pour préserver l'épitope phospho.
• En Western blot, une bande spécifique d'environ 43 kDa (le poids moléculaire de PDHA1) devrait être détectable. Validez la spécificité en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ou en utilisant un blocage par peptide non phosphorylé.
• Pour les applications ELISA, envisagez de revêtir les plaques avec le peptide immunogène phosphorylé comme contrôle positif et une contrepartie non phosphorylée pour confirmer la spécificité phospho.
• La réactivité croisée est rapportée pour la PDHA1 humaine, murine et de rat ; cependant, il est conseillé de vérifier la réactivité dans votre système d'échantillons, en particulier lors de l'utilisation d'extraits tissulaires non humains.

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