Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-PAK2 (S20) pour WB, ELISA - Q13177

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PAK2

• La sérine/thréonine-protéine kinase PAK2, également connue sous le nom de PAK65, Gamma-PAK ou p58, est un membre de la famille des kinases activées par p21 (PAK).
• Agit comme effecteur en aval des petites GTPases CDC42 et RAC1 ; la liaison conduit à l'autophosphorylation et à l'activation de la kinase. Références associées : PMID:7744004
• Phosphoryle divers substrats, notamment l'histone H4 pour favoriser l'assemblage des nucléosomes, JNK pour la prolifération induite par l'EGF, et MAPK4/6 pour réguler la polymérisation de l'actine F. Références associées : PMID:21724829, PMID:21177766, PMID:21317288
• Le clivage médié par la caspase génère PAK-2p34, qui se transloque dans le noyau et favorise l'apoptose via la signalisation JNK ; il phosphoryle également MKNK1 pour réduire la traduction cellulaire. Références associées : PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063, PMID:15234964
• Il se localise dans le cytoplasme, le noyau, la région périnucléaire et la membrane, et exerce des fonctions indépendantes de la kinase dans l'orientation du fuseau mitotique lorsqu'il est associé à ARHGEF7 et GIT1. Références associées : PMID:19273597, PMID:19923322
• Il est exprimé de manière ubiquitaire avec des niveaux plus élevés dans le muscle squelettique, l'ovaire, le thymus et la rate ; il est modifié post-traductionnellement par acétylation, myristoylation et conjugaison à l'ubiquitine.
• Il phosphoryle et inhibe également CASP7, empêchant l'apoptose. Références associées : PMID:21555521, PMID:27889207

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène étant un peptide phosphorylé synthétique autour de la sérine 20, cet anticorps est censé reconnaître spécifiquement PAK2 phosphorylé au niveau de S20 ; il est recommandé d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Pour le Western blot, validez dans des lignées cellulaires humaines exprimant PAK2 et confirmez la bande à ~58 kDa ; la réactivité croisée avec la souris et le rat permet des études sur ces espèces, mais l'homologie de séquence autour de S20 doit être vérifiée.
• En ELISA, utilisez un contrôle de peptide non phosphorylé pour vérifier la spécificité vis-à-vis de la phosphorylation.
• Incluez des contrôles appropriés (par exemple, lysats non traités vs traités à la phosphatase) pour confirmer la dépendance à la phosphorylation.
• Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées de manière empirique ; commencez par les recommandations du fabricant si elles sont disponibles.

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