Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-PAK1/2/3 (S144/S141/S139) pour WB et ELISA - Q13153 / Q13177 / O75914

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PAK1

• PAK1 (kinase 1 activée par p21, alpha-PAK) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui, avec PAK2 et PAK3, appartient à la famille PAK. Cet anticorps reconnaît la forme phosphorylée du résidu sérine conservé équivalent à S144 dans PAK1, S141 dans PAK2 et S139 dans PAK3, critiques pour l'activation de la kinase.
• Activée par les GTPases Rho CDC42 et RAC1, PAK1 relie les signaux extracellulaires aux voies intracellulaires contrôlant la dynamique du cytosquelette, l'adhésion cellulaire et la migration.
  Références associées : PMID:8805275 PMID:9528787
• PAK1 réorganise le cytosquelette d'actine en favorisant la formation des fibres de stress et des adhésions focales, régulant ainsi la forme et la motilité cellulaires.
  Références associées : PMID:9032240 PMID:9395435
• La kinase régule l'apoptose via la phosphorylation de RAF1, qui à son tour phosphoryle BAD et favorise sa séquestration mitochondriale.
  Références associées : PMID:11733498
• Au niveau subcellulaire, PAK1 se localise dans le cytoplasme, les jonctions cellulaires, les lamellipodes, les membranes de ruffles, les invadopodes, le noyau et le centrosome, correspondant à ses rôles multifacettes dans la signalisation et la structure cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'autophosphorylation sur de multiples résidus sérine/thréonine (y compris S144) et l'acétylation, qui modulent l'activité et la localisation.
• Sur le plan clinique, PAK1 est surexprimé dans le cancer gastrique, favorisant l'invasion et la migration, et a été associé à des troubles neurologiques.
  Références associées : PMID:25766321

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, utilisez des cocktails d'inhibiteurs de protéases et de phosphatases pendant la lyse cellulaire/tissulaire pour préserver l'état de phosphorylation. La bande attendue pour PAK1 est d'environ 65 kDa, mais de légères variations de taille peuvent survenir selon les espèces ou en raison de modifications post-traductionnelles.
• La spécificité du signal phospho peut être confirmée en traitant les échantillons avec la λ-phosphatase ou par des tests de compétition peptidique utilisant le peptide immunogène non phosphorylé.
• En ELISA, utilisez un peptide phosphorylé correspondant à l'immunogène comme antigène de revêtement, et incluez des contrôles appropriés (peptide non phosphorylé, blanc) pour évaluer la spécificité de l'anticorps.
• Puisque l'anticorps reconnaît un site phospho conservé partagé par PAK1/2/3, il est conseillé de vérifier l'identité de l'isoforme dans votre système en utilisant des anticorps totaux PAK isoforme-spécifiques ou une extinction par siRNA.

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