Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-p38 MAPK (Y182) pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 est une sérine/thréonine kinase qui constitue un composant essentiel de la voie de transduction du signal des MAP kinases, médiant les réponses cellulaires à des stimuli extracellulaires tels que les cytokines pro-inflammatoires et le stress physique.
• Elle phosphoryle et active des facteurs de transcription (par ex. CREB1, ATF1, RELA, STAT1, STAT3) et l'histone H3 via les kinases en aval MSK1 et MSK2, induisant ainsi l'expression des gènes précoces immédiats en réponse au stress ou à des stimuli mitogéniques. Références associées : PMID:9687510 PMID:9792677
• MAPK14 régule la synthèse protéique en activant MKNK1/MNK1 et MKNK2/MNK2, qui phosphorylent le facteur d'initiation EIF4E2. Références associées : PMID:11154262
• Elle module le turnover des protéines par phosphorylation de l'ubiquitine ligase SIAH2, contrôlant la dégradation d'EGLN3, et interfère également avec l'autophagie en affectant le trafic d'ATG9. Références associées : PMID:17003045 PMID:19893488
• Dans le cytoplasme, la voie des p38 MAPK est un régulateur important de l'endocytose ; par exemple, l'internalisation de l'EGFR médiée par la clathrine induite par les cytokines inflammatoires et l'irradiation UV dépend de la phosphorylation médiée par MAPK14 de l'EGFR et des effecteurs RAB5A. Références associées : PMID:16932740
• MAPK14 phosphoryle ADAM17, favorisant le clivage ectodoménique des ligands de la famille du TGF-alpha et l'activation subséquente de la signalisation de l'EGFR. Références associées : PMID:20188673
• La kinase phosphoryle CDC25B et CDC25C, entraînant un retard du cycle G2 après irradiation ultraviolet via la liaison à la protéine 14-3-3. Références associées : PMID:11333986
• MAPK14 est localisée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, et elle est exprimée dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique, avec des niveaux plus faibles dans le poumon, le foie et le rein. Les isoformes MXI2 et EXIP présentent des spécificités d'activation et de substrat distinctes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été obtenu contre un phosphopeptide synthétique correspondant au site de phosphorylation Y182. Pour confirmer la phospho-spécificité, il est recommandé de traiter les échantillons avec de la λ-phosphatase ou d'utiliser un peptide non phosphorylé comme contrôle de blocage dans des expériences parallèles.
• Pour le Western blotting, utilisez des contrôles positifs tels que des lysats cellulaires issus de cultures stimulées par des inducteurs de stress (par ex. anisomycine, irradiation UV ou cytokines pro-inflammatoires) pour induire une phosphorylation robuste de la p38 MAPK sur Y182.
• Lors de l'immunofluorescence, optimisez soigneusement les conditions de fixation et de perméabilisation, car des traitements drastiques peuvent altérer le phospho-épitope. L'ajout d'un cocktail d'inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation de l'échantillon peut aider à préserver le signal de phosphorylation.
• L'anticorps est qualifié pour WB, IF/ICC et ELISA. Pour d'autres applications, une validation supplémentaire dans le système d'échantillon concerné est recommandée.

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