Anticorps monoclonal anti-Phospho-p38 MAPK (T180) pour WB, IHC-P, ELISA - Q16539 / P53778 / Q15759

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (p38 alpha) est une sérine/thréonine kinase et un composant central de la voie de transduction du signal des MAP kinases, répondant aux stimuli de stress et aux cytokines pro-inflammatoires ; c'est l'un des quatre membres de la famille des p38 MAPK avec environ 200 à 300 substrats estimés par kinase.
• La kinase active rapidement les kinases en aval, y compris MAPKAPK2/MK2 et MAPKAPK3/MK3, qui régulent l'expression génique de manière post-transcriptionnelle en phosphorylant les protéines de liaison à l'ARNm telles que ZFP36 et ELAVL1, et en modulant le facteur d'élongation de la traduction EEF2K.
  Références associées :
  PMID:11154262
• Dans le noyau, p38 MAPK phosphoryle les facteurs de transcription (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, MEF2, p53, etc.) et les remodelateurs de chromatine, permettant l'induction rapide des gènes précoces immédiats et inflammatoires ; la phosphorylation de l'histone H3 (Ser‑10) par MSK1/2 facilite le recrutement de NF‑κB.
  Références associées :
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• La kinase fait la navette entre le cytoplasme et le noyau et est impliquée dans divers processus cellulaires : elle régule le renouvellement des protéines (par ex., la stabilité de CFLAR, la dégradation d'EGLN3 médiée par SIAH2), l'autophagie (trafic d'ATG9), l'endocytose des récepteurs (EGFR via les effecteurs RAB5A) et le clivage du domaine extracellulaire (phosphorylation d'ADAM17).
  Références associées :
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• MAPK14 subit une phosphorylation sur Thr‑180 et Tyr‑182 au sein de la boucle d'activation, un double événement essentiel pour l'activité kinase ; des modifications post-traductionnelles supplémentaires incluent l'acétylation et l'ubiquitination, comme indiqué dans les mots-clés UniProt.
• La protéine est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur, le placenta, le pancréas et le muscle squelettique ; une expression plus faible est observée dans le poumon, le foie et le rein.
• L'épissage alternatif génère des isoformes telles que MXI2 (répondant aux mitogènes et au stress oxydatif) et EXIP (impliquée dans le déclenchement précoce de l'apoptose) qui présentent des préférences de substrat et des résultats de signalisation différentiels.
• En réponse aux dommages à l'ADN, MAPK14 phosphoryle CDC25B/C conduisant à l'arrêt en phase G2, et TIAR pour stabiliser l'ARNm de GADD45A ; elle active également l'inflammasome NLRP1 après des collisions UV‑B ou ribosomiques.
  Références associées :
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide phosphorylé autour de Thr‑180 ; par conséquent, l'anticorps détecte principalement la p38 MAPK activée (phosphorylée). Pour vérification, envisagez de traiter les échantillons avec de la λ-phosphatase ou d'utiliser des lysats témoins non stimulés pour confirmer la spécificité phospho en Western blot.
• Pour l'immunohistochimie (IHC‑P), une récupération antigénique par micro-ondes ou autocuiseur peut améliorer la détection des épitopes phospho ; validez la spécificité de la coloration en pré-incubant l'anticorps avec le phosphopeptide immunisant.
• Les applications ELISA peuvent utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection pour quantifier la p38 activée dans les lysats cellulaires ; incluez si possible une protéine p38 phosphorylée recombinante comme contrôle de courbe standard.
• Lors de l'analyse de multiples isoformes de p38, notez que cet anticorps est susceptible de réagir de manière croisée avec la p38 bêta (MAPK11) et gamma (MAPK13) en raison d'une forte homologie de séquence autour de Thr‑180 ; validez la spécificité de l'isoforme dans le système d'échantillon pertinent.

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