Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-NRF2-S40 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16236

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du NRF2

• Identité de la protéine : NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2), codé par le gène NFE2L2, est un facteur de transcription à leucine zipper basique (bZIP) appartenant à la famille cap 'n' collar (CNC).
• Régulation de la réponse antioxydante : NRF2 se lie aux éléments de réponse antioxydante (ARE) dans les promoteurs des gènes de cytoprotection, y compris les enzymes de détoxification de phase 2, pour promouvoir leur expression et neutraliser les électrophiles réactifs. Références associées : PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Dégradation médiée par KEAP1 : Dans des conditions basales, NRF2 est ciblé pour l'ubiquitination et la dégradation protéasomique par le complexe BCR(KEAP1), maintenant ainsi de faibles niveaux cytoplasmiques. Références associées : PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• Activation par le stress oxydatif : En cas de stress oxydatif, les métabolites électrophiles inhibent l'activité de KEAP1, permettant à NRF2 de s'accumuler et de transloquer dans le noyau, où il hétérodimérise avec les protéines Maf petites et active la transcription. Références associées : PMID:19489739, PMID:29590092
• Activation médiée par l'autophagie : L'autophagie sélective déclenche également l'activation de NRF2 via l'inactivation du complexe KEAP1 médiée par SQSTM1/p62, reliant ainsi l'autophagie à l'homéostasie redox. Références associées : PMID:20452972
• Immunité innée et défense antivirale : NRF2 réprime la détection de l'ADN cytosolique antiviral en supprimant l'expression de STING1, et limite la libération de cytokines pro-inflammatoires lors d'infections virales, y compris le SARS-CoV-2, par l'inhibition d'IRF3. Il inhibe également la réplication de multiples virus de manière indépendante de l'interféron. Références associées : PMID:30158636, PMID:33009401
• Localisation subcellulaire et modifications post-traductionnelles : NRF2 transite entre le cytoplasme et le noyau. Il fait l'objet de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui contrôlent étroitement sa stabilité et son activité transcriptionnelle.
• Distribution tissulaire : NRF2 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés détectés dans le muscle adulte, le rein, le poumon, le foie et le muscle fœtal.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant aux résidus entourant la Ser40 du NRF2 humain. Pour une détection spécifique de la phosphorylation, confirmez que l'épitope est exposé dans votre système expérimental ; envisagez un traitement des échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver le signal phospho.
• Lors de la réalisation d'un Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 68 kDa ; vérifiez la spécificité de la bande à l'aide de témoins positifs et négatifs (par exemple, cellules soumises à un stress oxydatif vs non traitées ou modèles de knockdown KEAP1).
• Pour l'IF/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour maintenir l'intégrité de l'épitope phospho ; utilisez une fixation au PFA à 4 % et une perméabilisation avec un détergent doux comme point de départ.
• Cet anticorps convient pour le WB, l'IF/ICC et l'ELISA. Il est conseillé de titrer l'anticorps pour chaque application et de le valider sur les types d'échantillons humains pertinents.

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