Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-NRF2-S40 pour WB - Q16236

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de NRF2

• NRF2 (Nuclear factor erythroid 2-related factor 2), codé par NFE2L2, est un facteur de transcription qui régule les réponses cellulaires au stress oxydatif en se liant aux éléments de réponse antioxydants (ARE) dans les promoteurs des gènes cytoprotecteurs.
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• Dans des conditions basales, NRF2 est maintenu à de faibles niveaux par l'ubiquitination médiée par KEAP1 et la dégradation protéasomique dans le cytoplasme.
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• Lors d'un stress oxydatif ou d'un défi électrophile, KEAP1 est inhibé, permettant à NRF2 de transloquer dans le noyau, de se dimériser avec les protéines Maf petites, et d'activer la transcription des gènes dépendants des ARE.
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• NRF2 participe également à l'autophagie sélective, où l'interaction SQSTM1/p62-KEAP1 conduit à la stabilisation de NFE2L2 et à l'activation de la voie.
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• Au-delà de la régulation redox, NRF2 supprime les réponses immunitaires innées et inflammatoires en bloquant la transcription des cytokines pro-inflammatoires et en inhibant la dimérisation d'IRF3, et il restreint la réplication de virus, notamment le SARS-CoV-2, le HSV et le virus Zika.
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• NRF2 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés dans le muscle adulte, le rein, le poumon, le foie et le muscle fœtal. Au niveau sous-cellulaire, il effectue des navettes entre le cytoplasme et le noyau.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (par exemple au niveau de la Ser-40), l'acétylation, la glycation et l'ubiquitination, qui modulent sa stabilité et son activité.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de NRF2.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Pour le transfert Western (Western blotting), envisagez d'utiliser des conditions réductrices et de charger des quantités appropriées de protéines à partir de lysats cellulaires traités avec des agents de stress oxydatif (par exemple, H₂O₂) pour détecter la phosphorylation de NRF2 au niveau de la Ser-40.
• Pour l'IHC-P, validez la coloration dans les tissus positifs pour NRF2 tels que le foie ou le rein, et incluez un traitement par des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; vérifiez la taille de bande attendue (~68 kDa) chez les espèces concernées.
• En immunofluorescence, surveillez la translocation nucléaire après induction du stress oxydatif.
• Pour l'ELISA, utilisez des contrôles de peptides phosphorylés pour confirmer la spécificité.

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