Anticorps polyclonal de lapin Anti-Phospho-NPM1-T199 pour WB, ELISA - P06748

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la nucléophosmine

• La nucléophosmine (NPM1, également appelée B23, NO38, numatrine) est une phosphoprotéine nucléolaire essentielle à la biogenèse des ribosomes, coordonnant le traitement des ARNr et l'export nucléaire des ribosomes.
• Agit comme chaperonne d'histones pour les histones de cœur H3, H2B et H4, facilitant l'assemblage correct de la chromatine et la formation des nucléosomes.
• Régule la duplication des centrosomes et la réplication des centrioles ; sa phosphorylation par PLK2 déclenche la réplication centriolaire.
• Régule négativement l'activation de EIF2AK2/PKR et supprime l'apoptose ; antagonise le blocage G2/M induit par ATF5 pour favoriser la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:22528486
• Interagit avec MYC pour améliorer la transcription des gènes cibles de MYC, contribuant potentiellement à l'oncogenèse. Références associées : PMID:25956029
• Se localise principalement dans le nucléole, mais se trouve également dans le nucléoplasme, le cytoplasme et les centrosomes, ce qui reflète ses multiples fonctions cellulaires.
• Fait l'objet de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (par exemple sur Thr199), l'acétylation, l'ADP-ribosylation et l'ubiquitination, qui modulent son activité et son trafic subcellulaire.
• La surexpression et les mutations (par exemple, la dislocation cytoplasmique) sont associées à la leucémie myéloïde aiguë et d'autres cancers, ce qui souligne son rôle de proto-oncogène.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps spécifique d'une phosphorylation a été obtenu contre un peptide synthétique phosphorylé au niveau du Thr199 ; pour le WB, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Validez l'anticorps dans votre système expérimental en comparant les signaux entre des lysats non traités et traités par la phosphatase, ou en utilisant un blocage par peptide non phosphorylé.
• Pour l'ELISA, fixez sur le support le peptide phosphorylé pour évaluer la spécificité, et envisagez un test de réactivité croisée avec la NPM1 non phosphorylée.
• Étant donné que la NPM1 se déplace vers le cytoplasme dans certaines conditions, le fractionnement ou l'immunofluorescence peuvent compléter la détection de la distribution subcellulaire de la phospho-NPM1.

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