Anticorps polyclonal Anti-Phospho-NMDAR1 (S896/S897) pour WB, ELISA - Q05586

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NMDAR1 (GluN1)

• Encodé par le gène GRIN1, la protéine GluN1 (également désignée NR1, NMDAR1) est la sous-unité obligatoire des récepteurs NMDA, qui sont essentiels à la neurotransmission excitatrice dans le système nerveux central.
• Les récepteurs NMDA forment des canaux cationiques hétérotétramériques activés par ligand, avec une perméabilité élevée au calcium et un blocage par le magnésium dépendant de la tension, contribuant à la plasticité synaptique, l'apprentissage et la mémoire (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Références associées : PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• La sous-unité GluN1 s'associe avec les sous-unités GluN2 (A-D) ou GluN3 (A-B) pour former des récepteurs NMDA fonctionnels ; différentes compositions de sous-unités confèrent des propriétés pharmacologiques et cinétiques distinctes au canal (PubMed:26875626, PubMed:26919761, PubMed:36309015). Références associées : PMID:26875626 PMID:26919761 PMID:36309015
• L'ouverture du canal nécessite la liaison simultanée du L-glutamate à la sous-unité GluN2 et de la glycine ou de la D-sérine à la sous-unité GluN1, ainsi qu'une dépolarisation membranaire pour lever le blocage dépendant de la tension par le Mg²⁺ ; cela permet l'influx de Ca²⁺ et Na⁺ et l'efflux de K⁺ (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Références associées : PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• Le domaine C-terminal de GluN1 est soumis à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation des résidus Ser896 et Ser897, qui peuvent moduler le trafic et la fonction du récepteur.
• Les récepteurs NMDA sont principalement localisés sur la membrane de la densité postsynaptique des synapses excitatrices, ce qui les place au cœur de la signalisation et de la plasticité synaptiques.
• Les mutations du gène GRIN1 sont associées à des troubles neurodéveloppementaux, notamment l'épilepsie, la déficience intellectuelle et l'encéphalopathie épileptique développementale (DEE101), ce qui souligne le rôle critique de GluN1 dans le fonctionnement cérébral.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que cet anticorps reconnaît la phosphorylation au niveau des résidus S896/S897, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'épitope phosphorylé.
• Pour le Western Blot, le poids moléculaire prédit de NMDAR1 est d'environ 105 kDa ; utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple 8-10% de SDS-PAGE) et des conditions de transfert adaptées aux protéines de haut poids moléculaire.
• Validez la spécificité par des tests de compétition par peptide : pré-incubez l'anticorps avec le peptide immunogène phosphorylé ou un peptide non phosphorylé pour confirmer la reconnaissance phospho-spécifique.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé avec le peptide phosphorylé comme antigène de revêtement ; optimisez la concentration de revêtement et les conditions de détection.
• Envisagez d'utiliser des lysats témoins positifs issus de tissu cérébral humain, murin ou de rat, ou de lignées cellulaires neuronales connues pour exprimer NMDAR1.
• La réactivité croisée avec l'homme, la souris et le rat indique un épitope conservé ; toutefois, réalisez une validation dans l'espèce et le système modèle concernés.

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