Ac monoclonal Anti-Phospho-NFKB1-S337 de lapin pour WB, ELISA - P19838

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NFKB1

• NFKB1 code pour la protéine précurseur p105, qui est transformée en sous-unité active p50 du complexe facteur de transcription NF-kappa-B. La forme p105 retient également les protéines NF-kappa-B dans le cytoplasme. Références associées : PMID:1423592
• Le complexe NF-kappa-B est un facteur de transcription pléiotrope présent dans presque tous les types cellulaires et régule les gènes impliqués dans l'inflammation, l'immunité, la différenciation, la croissance cellulaire et l'apoptose.
• La sous-unité active p50 forme des hétérodimères avec RELA/p65 pour créer le complexe p65-p50, un activateur transcriptionnel majeur qui se lie à la séquence consensus kappa-B sur les enhancers des gènes cibles. Références associées : PMID:1740106, PMID:7830764
• Les homodimères p50-p50 agissent comme répresseurs transcriptionnels, mais peuvent devenir des activateurs lorsqu'ils sont associés à BCL3.
• NFKB1/p105 réprime également la signalisation MAPK induite par MAP3K8 jusqu'à ce que la dégradation dépendante du protéasome libère MAP3K8 active.
• La localisation subcellulaire alterne entre le cytoplasme (inactif, lié à des inhibiteurs) et le noyau (actif, après libération de I-kappa-B).
• La phosphorylation au niveau de la sérine 337 est l'une des nombreuses modifications post-traductionnelles qui régulent l'activité, le traitement ou les interactions de NFKB1 ; cet anticorps reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée sur ce site.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour du S337 ; confirmez la spécificité en utilisant des échantillons traités à la phosphatase ou en compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des échantillons de cellules stimulées pour activer la signalisation NF-kappa-B (par exemple avec le TNF-α) afin d'observer les décalages de bande phospho-spécifiques à 85kDa/105kDa.
• La détection par ELISA peut être optimisée en associant cet anticorps à un anticorps anti-NFKB1 total ou en utilisant une détection phospho-spécifique.
• Effectuez la validation sur des lignées cellulaires ou des tissus humains avec une activation connue de NF-kappa-B ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas garantie.
• Incluez toujours des contrôles négatifs et positifs appropriés pour distinguer le signal dépendant de la phosphorylation.

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