Ac Anti-Phospho-NF-kB p65/RelA (Ser529) Lapin mAb pour WB, ELISA - Q04206

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA est une sous-unité du complexe du facteur de transcription NF-kappa-B, qui forme divers homodimères et hétérodimères ; l'hétérodimère RELA-NFKB1 est le plus abondant.
• NF-kB régule un large éventail de processus biologiques tels que l'inflammation, l'immunité, la différenciation cellulaire et l'apoptose.
• Dans l'état inactif, NF-kB est retenu dans le cytoplasme par les protéines inhibitrices I-kappa-B ; lors d'une stimulation, I-kappa-B est phosphorylé et dégradé, permettant la translocation nucléaire de NF-kB.
• La phosphorylation à des résidus spécifiques, y compris Ser529, est une modification post-traductionnelle cruciale qui module l'activité transcriptionnelle de RelA, sa liaison à l'ADN et ses interactions avec les co-facteurs.
• RelA est essentiel pour l'expression des gènes de cytokines dans les cellules T.
  Références connexes :
  PMID:15790681
• RelA agit comme un facteur de transcription clé régulant la réponse aux interférons lors de l'infection par le SARS-CoV-2.
  Références connexes :
  PMID:33440148
• Au niveau subcellulaire, RelA effectue des allers-retours entre le cytoplasme et le noyau, un processus étroitement contrôlé par la phosphorylation et la liaison aux inhibiteurs.
• Il est soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui ajustent finement son activité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• En tant qu'anticorps spécifique du phosphosite, il est recommandé de traiter les échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases lors de leur préparation et de vérifier la spécificité du signal par des contrôles de déphosphorylation ou par un traitement avec les stimuli appropriés.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 60 kDa est attendue pour RelA pleine longueur ; cependant, le poids moléculaire apparent peut varier en raison de multiples événements de phosphorylation.
• Pour les applications ELISA, l'utilisation d'un peptide immunogène ou d'une protéine standard phosphorylée peut aider à optimiser les concentrations de revêtement et la sensibilité de détection.
• Des tests de réactivité croisée avec des espèces non humaines peuvent être justifiés si la séquence cible est conservée, mais les données de validation ne sont disponibles que pour des échantillons humains.
• Titrez toujours l'anticorps dans vos conditions expérimentales spécifiques pour déterminer les dilutions de travail optimales.

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