Anti-Phospho-MET-Y1234/1235 Lapin pAb pour WB, ELISA - P08581

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MET

• MET, également connu sous le nom de récepteur du facteur de croissance des hépatocytes (HGFR), proto-oncogène c-Met et récepteur du facteur de dispersion, est un récepteur tyrosine kinase qui transduit les signaux de la matrice extracellulaire après liaison à son ligand HGF. Il régule des processus clés tels que la prolifération, la dispersion, la morphogenèse et la survie.
• Après liaison du ligand, le MET subit une autophosphorylation sur des résidus tyrosine dont Y1234 et Y1235 dans la boucle d'activation, ce qui crée des sites d'amarrage pour des effecteurs en aval comme PI3K, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 et GAB1. Cela déclenche de multiples cascades : RAS-ERK (effets morphogénétiques), PI3K-AKT (pro-survie) et PLCgamma-PKC.
• Pendant le développement embryonnaire, la signalisation MET est essentielle pour la gastrulation, la migration des précurseurs neuronaux, l'angiogenèse, la formation des reins et le développement des muscles squelettiques (migration des progéniteurs musculaires et prolifération des myoblastes secondaires). Chez l'adulte, elle contribue à la cicatrisation, à la régénération des organes, au remodelage tissulaire et à l'hématopoïèse.
• Le MET est principalement localisé à la membrane cellulaire, mais une forme sécrétée existe également. Il est exprimé dans les hépatocytes normaux et les cellules épithéliales de l'estomac, de l'intestin grêle et du gros intestin, ainsi que dans les kératinocytes basaux de l'œsophage et de la peau. Une expression élevée est observée dans le foie, le tractus gastro-intestinal, la thyroïde, les reins et le cerveau, avec des niveaux de protéines détectables dans l'os métaphysaire. Références associées : PMID:26637977
• La protéine agit comme un récepteur pour l'internaline InlB de *Listeria monocytogenes*, médiant l'entrée de la bactérie dans les cellules hôtes.
• Le MET est classé comme une tyrosine-protéine kinase, une glycoprotéine et une phosphoprotéine, et est associé à des réarrangements chromosomiques liés à des maladies. Il est également sujet à l'épissage alternatif et à la conjugaison à l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps est un peptide phosphorylé synthétique couvrant Y1234 et Y1235 du MET humain. Pour le WB et l'ELISA, envisagez d'inclure une compétition avec un peptide non phosphorylé ou des lysats traités à la phosphatase pour confirmer la spécificité de la phosphorylation.
• Pour le WB, une bande d'environ 156 kDa est attendue. Comme le MET est une protéine membranaire, utilisez des tampons de lyse appropriés (par exemple, RIPA) et incluez des inhibiteurs de protéases/phosphatases. Pour l'ELISA, validez l'anticorps avec le peptide phospho-recouvert et des témoins appropriés.
• Stimuler les cellules avec du HGF avant la lyse peut améliorer la détection du MET phosphorylé sur ces sites. Tenez compte des niveaux de phosphorylation basale dans votre lignée cellulaire d'intérêt.
• Cet anticorps est validé pour des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas établie.

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