Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-LRRK2-S935 pour WB et ELISA - Q5S007

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la LRRK2

• La LRRK2 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 2), également connue sous le nom de Dardarine ou PARK8, est une grande protéine multidomaine de 286 kDa appartenant à la famille ROCO. Elle contient des répétitions riches en leucine, un domaine GTPase Roc, un domaine COR, un domaine kinase et des répétitions WD40.

• La LRRK2 fonctionne comme une sérine/thréonine kinase et une GTPase, phosphorylant un large éventail de substrats impliqués dans la plasticité neuronale, l'immunité innée, l'autophagie et le trafic vésiculaire. Références associées : PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• C'est un régulateur clé des GTPases RAB, phosphorylant de multiples protéines RAB (notamment RAB3, RAB8, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35 et RAB43) pour contrôler leur association membranaire et leurs interactions avec les effecteurs, modulant ainsi le trafic vésiculaire et la ciliogenèse. Références associées : PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718

• La LRRK2 régule positivement l'autophagie via une voie calcique dépendante de CAMKK/AMPK, et elle est recrutée vers les lysosomes surchargés où elle phosphoryle RAB8A et RAB10 pour favoriser la libération du contenu lysosomal. Références associées : PMID:22012985 PMID:30209220 PMID:38227290

• Agit comme un régulateur positif de l'immunité innée en médiant la phosphorylation de RIPK2 en aval de NOD1 et NOD2, améliorant ainsi l'activation de RIPK2. Références associées : PMID:27830463

• Se localise dans de multiples compartiments cellulaires, notamment les vésicules cytoplasmiques, la membrane de l'appareil de Golgi, le réticulum endoplasmique, les endosomes, les lysosomes, la membrane externe mitochondriale, les vésicules synaptiques et les projections cellulaires telles que les axones et les dendrites.

• Fortement exprimée dans le cerveau, en particulier dans les neurones pyramidaux, les zones dopaminoceptives et la substantia nigra pars compacta ; également exprimée dans le cœur, le foie, les poumons, les reins et les cellules immunitaires comme les neutrophiles. Références associées : PMID:29127255

• Les mutations de la LRRK2 sont la cause génétique la plus fréquente de la maladie de Parkinson familiale, les variants pathogènes se regroupant dans les domaines GTPase et kinase.

Guide expérimental et conseils techniques

• Comme il s'agit d'un anticorps phospho-spécifique (anti-phospho-S935), veillez à inclure des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver les signaux de phosphorylation.
• Pour le WB, le poids moléculaire élevé (286 kDa) nécessite des conditions de séparation adéquates ; envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés.
• Validez la spécificité en comparant les signaux entre les formes phosphorylées et non phosphorylées ; le blocage par le peptide immunogène phospho-peptidique peut confirmer la phospho-spécificité.
• Une réactivité croisée avec la LRRK2 de souris et de rat (probablement au site phospho équivalent) a été rapportée ; vérifiez l'homologie de séquence de l'épitope immunogène chez ces espèces.
• Pour l'ELISA, les formats directs ou en sandwich classiques peuvent être utilisés ; titrez la concentration d'anticorps dans le système d'échantillon pertinent.

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