Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-JNK1/2/3 (T183/T183/T221) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P45984 / P53779

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de JNK1/JNK2/JNK3

• La protéine kinase 8 activée par les mitogènes (MAPK8/JNK1) est une sérine/thréonine-protéine kinase appartenant à la famille des c-Jun N-terminal kinases (JNK), qui inclut également MAPK9/JNK2 et MAPK10/JNK3. Ces kinases sont codées respectivement par MAPK8, MAPK9 et MAPK10 et partagent des sites de phosphorylation conservés dans la boucle d'activation (Thr183 dans JNK1/JNK2 et Thr221 dans JNK3).
• JNK1 est un médiateur central de la voie de signalisation de la protéine kinase activée par le stress (SAP/JNK), qui est stimulée par les cytokines pro-inflammatoires et le stress physique. JNK1 activé phosphoryle des facteurs de transcription incluant JUN, JDP2 et ATF2, régulant ainsi l'activité transcriptionnelle d'AP-1 (PubMed:18307971).
  Références associées :
  PMID:18307971
• JNK1 favorise l'apoptose en phosphorylant p53/TP53 et YAP1 (PubMed:21364637). Il soutient également la survie des érythroblastes en phosphorylant BAD après stimulation par l'EPO (PubMed:21095239) et médie l'autophagie induite par le jeûne via la phosphorylation de BCL2 (PubMed:18570871).
  Références associées :
  PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 phosphoryle un large éventail de substrats incluant CDT1 (PubMed:21856198), HSF4 (PubMed:16581800), SIRT1 (PubMed:17296730), ELK1, ITCH (PubMed:20027304), CLOCK-BMAL1 (PubMed:22441692), NLRP3 (PubMed:28943315) et SIRT6 (PubMed:27568560), l'impliquant dans la réplication de l'ADN, le rythme circadien, l'activation de l'inflammasome et les réponses au stress cellulaire.
  Références associées :
  PMID:21856198, PMID:16581800, PMID:17296730, PMID:20027304, PMID:22441692, PMID:28943315, PMID:27568560
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de JNK1 (alpha-1, alpha-2, bêta-1, bêta-2) avec des affinités de liaison différentes pour c-Jun et ATF2, bien que toutes les isoformes phosphorylent les substrats avec une efficacité comparable.
• JNK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les synapses, lui permettant de réguler à la fois la transcription nucléaire et les événements cytoplasmiques tels que la capture des vésicules synaptiques via la phosphorylation de SYT4.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide phospho-synthétique autour de Thr183 de JNK1 humain. Ce résidu de la boucle d'activation (Thr183 dans JNK1/JNK2, Thr221 dans JNK3) est conservé parmi les trois membres de la famille JNK, ce qui explique la multi-spécificité observée dans les spécifications.
• Pour le Western blot, utilisez des tampons de lyse complétés avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver le signal de phosphorylation. Les poids moléculaires prédits vont de 35 à 52 kDa, mais la position réelle des bandes peut varier en raison de l'expression des isoformes et des modifications post-traductionnelles ; validez dans le système d'échantillon pertinent.
• En immunohistochimie et immunofluorescence, la détection spécifique de la phosphorylation peut nécessiter une récupération antigénique et une optimisation minutieuse des conditions de fixation/permeabilisation. Incluez toujours un contrôle non-phosphorylé ou un traitement par phosphatase pour vérifier la spécificité du signal.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser cet anticorps en paire avec un anticorps de capture JNK total pour quantifier les niveaux de phosphorylation relatifs à l'expression protéique totale.

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