Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Phospho-JNK1-T183/Y185 + JNK2-T183/Y185 + JNK3-T221/Y223 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P45983/P45984/P53779

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de JNK1/2/3

• Membre de la famille des kinases activées par des mitogènes (MAPK), également connues sous le nom de kinases activées par le stress (SAPK), incluant JNK1 (MAPK8), JNK2 (MAPK9) et JNK3 (MAPK10).
• Activé par double phosphorylation sur un motif Thr-Pro-Tyr (T183/Y185 chez JNK1) par les kinases en amont MAP2K4/MKK4 et MAP2K7/MKK7 en réponse à des stimuli de stress.
• Phosphoryle et régule des facteurs de transcription, notamment c-Jun, ATF2 et ELK1, modulant ainsi l'activité transcriptionnelle d'AP-1. Références connexes : PMID:18307971
• Impliqué dans la prolifération cellulaire, la différenciation, l'apoptose et l'autophagie en ciblant des protéines clés telles que p53/TP53, BAD, BCL2 et BECN1. Références connexes : PMID:21364637 PMID:21095239 PMID:18570871
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et les synapses ; la translocation vers le noyau se produit lors de l'activation.
• Contribue à la signalisation inflammatoire en phosphorylant NLRP3, favorisant l'assemblage de l'inflammasome. Références connexes : PMID:28943315
• Régule le rythme circadien par la phosphorylation de l'hétérodimère CLOCK-BMAL1. Références connexes : PMID:22441692
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes (par exemple, JNK1 alpha et bêta) avec des préférences de liaison aux substrats distinctes.

Guidelines Expérimentales et Conseils Techniques

• Puisque cet anticorps reconnaît des épitopes dépendants de la phosphorylation, traitez les échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse et évitez un stockage prolongé à température ambiante pour préserver les signaux phospho.
• Pour le Western blotting, attendez-vous à des bandes à environ 48-52 kDa correspondant à JNK1/2 ; des bandes supplémentaires pour JNK3 peuvent être observées à des poids moléculaires similaires ; utilisez des témoins positifs tels que des cellules traitées aux UV ou à l'anisomycine.
• Pour l'immunoprécipitation (IF-P), les étapes de perméabilisation et de blocage sont critiques ; validez la coloration sur des lignées cellulaires pertinentes stimulées par le stress.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez une récupération de l'antigène avec un tampon citrate (pH 6,0) et testez les dilutions d'anticorps dans des tissus connus pour présenter une activation de JNK, tels que ceux soumis à des conditions inflammatoires ou apoptotiques.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; la réactivité croisée avec les protéines JNK non phosphorylées doit être évaluée à l'aide d'essais de compétition peptidique appropriés.

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