Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Phospho-IRS1-S612 pour WB, IHC-P, ELISA - P35568

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'IRS1

• Le substrat du récepteur de l'insuline 1 (IRS1) est une protéine adaptatrice de signalisation qui médie la transduction du signal à partir du récepteur de l'insuline (INSR) et du récepteur du facteur de croissance de type insuline I (IGF1R), jouant un rôle critique dans le développement, la croissance, l'homéostasie du glucose et le métabolisme lipidique. Références associées : PMID:7541045, PMID:33991522, PMID:38625937, PMID:19639489
• Lors de sa phosphorylation par le récepteur de l'insuline, l'IRS1 fonctionne comme une échafaudage de signalisation qui propage l'action de l'insuline en se liant à des protéines contenant un domaine SH2, y compris la sous-unité régulatrice p85 de la PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 et SHP2. Références associées : PMID:11171109, PMID:8265614
• Le recrutement de GRB2 active la voie Ras/Raf/MEK/MAPK, tandis que le recrutement de la PI3K déclenche la voie PI3K/AKT, coordonnant les réponses métaboliques et mitogènes.
• L'IRS1 agit comme un régulateur positif de la voie de signalisation Wnt/bêta-caténine en supprimant la dégradation autophagique médiée de DVL2, favorisant ainsi la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:24616100
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme et le noyau.
• L'IRS1 subit des modifications post-traductionnelles étendues, notamment la phosphorylation, la S-nitrosylation et l'ubiquitination. Cet anticorps détecte spécifiquement la phosphorylation sur la sérine 612, un site régulateur de la signalisation de l'IRS1.
• Les variations génétiques de l'IRS1 sont associées à la susceptibilité au diabète sucré.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour du S612 ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement l'IRS1 phosphorylé sur ce site. Pour le western blot, envisagez de confirmer la spécificité phospho par un traitement à la phosphatase lambda ou par des essais de compétition aux peptides phospho.
• Le poids moléculaire prédit de l'IRS1 est d'environ 132 kDa. Lors de la réalisation d'un WB, utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, SDS-PAGE à 8 %) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de poids moléculaire élevé.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère une conservation de la séquence de l'épitope ; cependant, une validation dans le système d'échantillon pertinent est recommandée.
• Pour l'IHC-P, une récupération de l'antigène peut être nécessaire, et l'ajout d'inhibiteurs de phosphatases lors du traitement des tissus peut aider à préserver la phosphorylation. La dilution de l'anticorps primaire et l'incubation doivent être optimisées empiriquement.
• Dans les applications ELISA, le revêtement avec le peptide phosphorylé est recommandé, et la détection peut être effectuée à l'aide de protocoles ELISA indirects standard.

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