Anticorps monoclonal de lapin anti-phospho-IRF3-S396 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q14653

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRF3

• Le facteur de régulation de l'interféron 3 (IRF3) est un régulateur transcriptionnel clé des réponses immunitaires dépendantes de l'interféron (IFN) de type I, essentiel à la défense innée contre les virus à ADN et à ARN.
• Lors d'une infection virale ou d'une signalisation par les récepteurs de type Toll (TLR), l'IRF3 est phosphorylé par les kinases IKBKE et TBK1, ce qui favorise sa dimérisation, sa translocation nucléaire et son association avec CREBBP pour former le complexe DRAF1 (dsRNA-activated factor 1) qui active la transcription de l'IFN-alpha/beta et des ISG.
  Références associées :
  PMID:22394562
  PMID:25636800
  PMID:27302953
  PMID:16154084
  PMID:33440148
• Il se lie aux éléments de réponse stimulés par l'interféron (ISRE) dans les promoteurs de gènes, agissant comme un activateur plus puissant de l'IFNB que de l'IFNA et contribuant aux phases d'induction précoce et tardive de l'IFN.
  Références associées :
  PMID:11846977
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  PMID:16979567
  PMID:20049431
• En réponse à une infection par le virus Sendai, l'IRF3 est recruté vers les mitochondries via TOMM70:HSP90AA1, où il déclenche l'apoptose par l'activation de BAX dans les macrophages primaires.
  Références associées :
  PMID:25609812
• L'IRF3 est un médiateur crucial de la réponse IFN lors de l'infection par le SARS-CoV-2, soulignant son rôle dans la défense antivirale contre les pathogènes émergents.
  Références associées :
  PMID:33440148
• Sur le plan subcellulaire, l'IRF3 se localise principalement dans le cytoplasme à l'état inactif, transloque vers le noyau lors de l'activation, et s'associe également aux mitochondries pour réguler l'apoptose.
• Il est exprimé de manière constitutive dans un large éventail de tissus, soulignant son rôle basal dans la surveillance immunitaire innée.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui contrôlent étroitement son activité et sa stabilité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western Blot, attendez-vous à une bande à environ 47 kDa. Validez la spécificité de la phosphorylation en traitant les échantillons avec de la lambda phosphatase ou en utilisant un contrôle de blocage par peptide non phosphorylé.
• Dans les expériences d'IF/ICC, des stimuli tels que le poly(I:C) ou une infection virale peuvent être utilisés pour induire la translocation nucléaire de l'IRF3, améliorant ainsi la détection de la forme phosphorylée.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'IRF3 de souris ; par conséquent, envisagez d'utiliser des lignées cellulaires dérivées de souris ou des cellules primaires traitées avec des agonistes TLR appropriés pour les études fonctionnelles.
• Pour l'ELISA, optimisez les concentrations de l'antigène de revêtement et les dilutions de l'anticorps secondaire pour garantir la spécificité vis-à-vis de l'épitope phosphorylé S396.

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