Anticorps polyclonal de lapin anti-IκBα phosphorylé (Ser36) pour WB et ELISA - P25963

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de IκBα (Inhibiteur Alpha de NF-κB)

• IκBα (inhibiteur alpha de NF-κB), codé par le gène NFKBIA, est un régulateur critique de la voie de signalisation NF-κB, fonctionnant principalement pour retenir les dimères NF-κB dans le cytoplasme.
  Références connexes :
  PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976

• Lors d'une stimulation par des cytokines ou des pathogènes, IκBα est phosphorylé sur les résidus sérine 32 et 36, ce qui le cible pour la polyubiquitination et la dégradation par le protéasome, permettant la translocation nucléaire de NF-κB et l'activation des gènes.
  Références connexes :
  PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813

• La protéine contient de multiples répétitions ankyrine qui médient son interaction avec les sous-unités p65 et p50 de NF-κB, masquant leurs signaux de localisation nucléaire.

• IκBα effectue un navette entre le cytoplasme et le noyau ; il peut entrer dans le noyau pour retirer NF-κB de l'ADN et le séquestrer à nouveau dans le cytoplasme, assurant des réponses transcriptionnelles transitoires.

• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'ubiquitination, l'hydroxylation et la formation de liaisons iso-peptidiques, régulent étroitement la stabilité et la fonction d'IκBα.

• Les mutations du gène NFKBIA sont associées à la dysplasie ectodermique avec immunodéficience (EDA-ID), soulignant son rôle essentiel dans le développement et l'homéostasie du système immunitaire.

• Les pathogènes viraux ciblent souvent IκBα pour moduler la signalisation NF-κB, mettant en évidence son implication dans les interactions hôte-virus.

Guidance expérimentale et conseils techniques

• L'anticorps a été élevé contre un phosphopeptide synthétique correspondant à la Ser36 du IκBα humain ; il détecte probablement spécifiquement IκBα uniquement lorsqu'il est phosphorylé sur ce résidu. Il est conseillé de valider la spécificité phospho-spécifique par un traitement à la phosphatase ou une compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, stimulez les cellules (par exemple, avec du TNF-α ou de l'IL-1β) pour induire une phosphorylation robuste de IκBα. Une expérience en cinétique temporelle peut être nécessaire pour capturer la nature transitoire de cette modification.
• Sur la base de la similarité de séquence, l'anticorps est censé réagir de manière croisée avec le phospho-IκBα de souris et de rat. Cependant, il est recommandé de vérifier l'alignement des séquences peptidiques autour de la Ser36 chez ces espèces.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection dans un format ELISA sandwich. Optimisez empiriquement les conditions de revêtement et de détection.
• Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation ; stockez l'anticorps à -20°C dès réception pour maintenir son activité.

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