Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-IκBα (Ser32) pour WB, ELISA - P25963

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IκBα

• L'inhibiteur alpha de NF-κB (IκBα) est un régulateur clé des facteurs de transcription NF-κB, encodé par le gène NFKBIA. Il est également connu sous le nom de I-kappa-B-alpha, IkB-alpha et MAD3.
• L'IκBα fonctionne en se liant aux dimères de NF-κB (tels que RELA/p65 et NFKB1/p50) dans le cytoplasme, masquant leurs signaux de localisation nucléaire et empêchant leur translocation nucléaire. Références associées : PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976
• En réponse à une stimulation pro-inflammatoire ou immunitaire, l'IκBα subit une phosphorylation sur les résidus sérine 32 et 36, conduisant à son ubiquitination et à sa dégradation par le protéasome, libérant ainsi NF-κB pour qu'il transloque dans le noyau et active la transcription. Références associées : PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813
• L'IκBα est principalement localisé dans le cytoplasme mais peut transiter vers le noyau, où il peut également inhiber la liaison de NF-κB à l'ADN ou médier la terminaison de la réponse NF-κB.
• La phosphorylation sur Ser32 est un événement critique dans la voie de signalisation canonique de NF-κB, ce qui en fait un biomarqueur largement étudié pour l'activation de cette voie.
• Les mots-clés d'UniProt indiquent que l'IκBα est une phosphoprotéine, subit une ubiquitination et est impliquée dans les interactions hôte-virus, soulignant son rôle central dans la signalisation immunitaire et les maladies.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 35,6 kDa (calculé) et contient des domaines de répétition ankyrine qui médient les interactions avec NF-κB.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique autour de Ser32 de l'IκBα humain ; par conséquent, l'anticorps reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée. Incluez toujours des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour Western blot afin de préserver le signal de phosphorylation.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection pour quantifier la phospho-IκBα dans des lysats cellulaires ou tissulaires ; envisagez de le coupler avec un anticorps anti-IκBα total pour la normalisation.
• Confirmez la spécificité de l'anticorps dans votre système en traitant les échantillons avec de la phosphatase lambda ou en utilisant un peptide non phosphorylé comme compétiteur.
• Une réactivité croisée est rapportée pour l'humain, la souris et le rat. Validez les réactivités dans l'espèce pertinente avant les expériences à grande échelle, car la conservation de l'épitope peut varier.

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