Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Histone H3.3 (Ser31) pour WB, IHC-P, ELISA - P84243

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3.3

• L'Histone H3.3 est une histone variante qui remplace l'histone H3 conventionnelle dans un large éventail de nucléosomes des gènes actifs, et constitue la forme majoritaire d'histone H3 dans les cellules non divisées.
• Contrairement aux histones canoniques, H3.3 est incorporée dans la chromatine indépendamment de la synthèse d'ADN, marquant les régions transcriptionnellement actives et maintenant une empreinte épigénétique.
• Les nucléosomes contenant H3.3 jouent un rôle central dans la régulation de l'accessibilité à l'ADN, influençant la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique.
• H3.3 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation et la phosphorylation, qui constituent le code histone et modulent la structure de la chromatine et l'expression génique.
• La localisation subcellulaire est restreinte au noyau, où H3.3 est un composant intégral des chromosomes.
• La protéine H3.3 est codée par deux gènes, H3-3A (H3F3A) et H3-3B (H3F3B), qui produisent tous deux des histones matures identiques.
• Des mutations des gènes H3.3 sont associées à des déficits intellectuels et d'autres phénotypes pathologiques, ce qui met en évidence son rôle essentiel dans le développement neurologique.
• La phosphorylation de la sérine 31 (S31) est l'une des modifications dynamiques de H3.3, et les conséquences fonctionnelles font actuellement l'objet de recherches actives.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant aux résidus autour du Ser31 de l'H3.3 humaine ; on s'attend à ce que l'anticorps reconnaisse spécifiquement la forme phosphorylée, et non la protéine non modifiée.
• Pour le Western blotting, on attend une bande d'environ 15 kDa. Ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver les signaux de phosphorylation.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) sur coupes de paraffine, les conditions de démasquage antigénique peuvent nécessiter une optimisation ; envisagez de tester les méthodes à base de citrate ou d'EDTA.
• La large réactivité croisée prédite suggère une utilisation potentielle chez d'autres espèces ; validez-la dans votre système modèle souhaité avant une utilisation à grande échelle.
• ELISA peut être utilisé pour la détection quantitative ; associez-le à des anticorps secondaires et des contrôles appropriés.

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